ACC氧化酶是合成乙烯的关键酶，由ACC氧化酶基因控制合成。科研人员将人工合成的ACC氧化酶基因反向插入到质粒的启动部位之后，构成反义ACC氧化酶基因，再通过农杆菌转化法转入番茄染色体DNA中。反义ACC氧化酶基因在番茄细胞中的转录产物能与ACC氧化酶基因的转录产物互补配对，抑制乙烯的产生，使番茄减缓成熟。请回答：
（1）科研人员能直接用化学合成ACC氧化酶基因的前提条件是 已知ACC氧化酶基因的碱基序列已知ACC氧化酶基因的碱基序列。人工合成ACC氧化酶基因后，需用 PCRPCR进行扩增。
（2）在构建重组质粒时，为确保ACC氧化酶基因反向插入质粒中，需用 22种限制性核酸内切酶切割目的基因和Ti-质粒。为了便于转化后的筛选，表达载体还应具有 抗性基因（或标记基因）抗性基因（或标记基因）。
（3）将含有重组质粒的农杆菌液涂抹在无菌番茄幼苗的芽尖，适宜时间后，用 无菌水无菌水冲洗芽尖除菌，接种于 固体固体（填“固体”或“液体”）培养基，经脱分化形成愈伤组织，进而形成转基因植株。实验中选择番茄幼苗的芽尖作为外植体的原因是 芽尖具有分生组织，全能性表达能力强芽尖具有分生组织，全能性表达能力强。
（4）反义ACC氧化酶基因抑制转基因番茄乙烯的产生，从基因表达的过程来看，是通过对 翻译翻译过程的调控来实现的。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】已知ACC氧化酶基因的碱基序列；PCR；2；抗性基因（或标记基因）；无菌水；固体；芽尖具有分生组织，全能性表达能力强；翻译
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：4引用：1难度：0.6
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
