乳铁蛋白属于转铁蛋白,是乳汁中主要的铁结合蛋白,具有免疫以及参与调节铁代谢和细胞生长等功能。由于人乳的来源有限,不可能通过直接提取的方法来大量获得人乳铁蛋白,所以科研人员将人乳铁蛋白基因进行异源表达(在其他生物体的组织细胞中表达)。回答下列问题:
(1)科研人员首先从人体的 乳腺乳腺组织细胞中获取乳铁蛋白的mRNA,并通过 逆转录逆转录获得乳铁蛋白的cDNA,该cDNA不含内含子的原因是 成熟的mRNA中不含内含子的转录区段(mRNA在加工过程中切除了内含子的转录区段)成熟的mRNA中不含内含子的转录区段(mRNA在加工过程中切除了内含子的转录区段)。
(2)将获得的人乳铁蛋白的cDNA采用PCR技术进行大量扩增。PCR扩增乳铁蛋白基因的前提是 已知一段乳铁蛋白基因的核苷酸序列已知一段乳铁蛋白基因的核苷酸序列,PCR每次循环可分为 变性、复性和延伸变性、复性和延伸三步。PCR反应所需的酶是 热稳定DNA聚合酶(Taq酶)热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。
(3)在人乳铁蛋白基因与质粒构建成的基因表达载体中,为了控制人乳铁蛋白基因转录,在该基因的前后端应分别构建 启动子、终止子启动子、终止子等元件。通过显微注射法将基因表达载体导入小鼠的睾丸中,将该小鼠与正常母鼠交配获得阳性(含目的基因)子代,阳性子代中只有一半能产生人乳铁蛋白,原因可能是 阳性子代中只有雌性个体能产生人乳铁蛋白阳性子代中只有雌性个体能产生人乳铁蛋白。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定.
【答案】乳腺;逆转录;成熟的mRNA中不含内含子的转录区段(mRNA在加工过程中切除了内含子的转录区段);已知一段乳铁蛋白基因的核苷酸序列;变性、复性和延伸;热稳定DNA聚合酶(Taq酶);启动子、终止子;阳性子代中只有雌性个体能产生人乳铁蛋白
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:8引用:4难度:0.7
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