农杆菌是—种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。植物基因工程中常用含有重组Ti质粒的农杆菌和受体植物细胞的愈伤组织共培养，进行转基因操作。现有一段抗除草剂基因编码蛋白质的区域在克隆载体上，要将其转入烟草细胞，得到抗除草剂的转基因烟草。
（1）在构建表达载体的过程中，要先用限制酶对目的基因和Ti质粒进行切割，之后用连接酶连接形成重组质粒。科学家使用了两种不同的限制酶分别切割目的基因和Ti质粒，原因是防止质粒自身环化，并保证目的基因以正确的方向与Ti质粒进行连接目的基因以正确的方向与Ti质粒进行连接。
（2）在以上重组质粒中，目的基因和抗卡那霉素抗性基因，都应该位于T-DNAT-DNA片段内，因为Ti质粒上只有T-DNA片段能够整合到受体细胞的染色体DNA上Ti质粒上只有T-DNA片段能够整合到受体细胞的染色体DNA上。
（3）将重组的Ti质粒转入农杆菌可用Ca2+Ca2+处理。得到的农杆菌菌液和烟草细胞愈伤组织共培养一段时间后，将愈伤组织置于含有霉素霉素和除草剂的选择培养基上进行组织培养，通过调整生长素和细胞分裂素（植物激素）的比例生长素和细胞分裂素（植物激素）的比例，使其脱分化、再分化形成转基因植株群体P。
（4）转入的除草剂抗性基因的遗传符合孟德尔遗传，且不考虑突变的情况下，让转基因植株P自交，F1株系分隔种植，得到的F1株系植株用除草剂处理，其中大多数株系抗性和非抗性的比例为3：1。有极少数株系不发生性状分离，全是除草剂抗性植株，原因可能是有两个基因分别转入一对同源染色体上有两个基因分别转入一对同源染色体上。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】目的基因以正确的方向与Ti质粒进行连接；T-DNA；Ti质粒上只有T-DNA片段能够整合到受体细胞的染色体DNA上；Ca2+；霉素；生长素和细胞分裂素（植物激素）的比例；有两个基因分别转入一对同源染色体上
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/6/27 10:35:59组卷：14引用：1难度：0.7
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
