乙烯具有促进果实成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术（原理如图1），可以抑制这两个基因的表达，从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点，如图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。
（1）图2中的2A11为特异性启动子，则该2A11应在番茄的果实果实 （器官）中启动基因的转录。
（2）从番茄成熟果实中提取RNARNA 为模板，利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以进行拼接构成融合基因。
（3）合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点，ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点，用限制酶XbaⅠXbaⅠ 对上述两个基因进行酶切，再串联成融合基因，相应的Ti质粒应用限制酶BamHⅠ和SacⅠBamHⅠ和SacⅠ 进行切割，确保融合基因能够插入载体中。
（4）为了实现图1中反义基因的效果，应将融合基因反向反向 （正向/反向）插入在启动子2A11的下游即可构成反义融合基因。将图中表达载体与农杆菌菌液混合后，接种在含有卡那霉素卡那霉素 的培养基中，可筛选出含有反义融合基因的农杆菌，再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。
（5）在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时，不能不能（填“能”/“不能”）用放射性物质标记的ACC氧化（合成）酶基因片段做探针进行检测，理由是番茄细胞内本来就存在ACC氧化（合成）酶基因番茄细胞内本来就存在ACC氧化（合成）酶基因。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】果实；RNA；XbaⅠ；BamHⅠ和SacⅠ；反向；卡那霉素；不能；番茄细胞内本来就存在ACC氧化（合成）酶基因
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/4/20 14:35:0组卷：71引用：7难度：0.6
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
相关试卷
