乙醇燃料已成为国际上普遍公认可降低环境污染和取代化石燃料的主要资源。可利用纤维素分解菌将植物秸秆中的纤维素降解为小分子糖类，后经酵母菌发酵即可生产乙醇。下面是分离、筛选纤维素分解菌的部分过程，请回答相关问题：
（1）从富含纤维素的环境中分离得到纤维素分解菌，这说明寻找目的菌株的方法之一是

到相应生存环境中寻找

到相应生存环境中寻找

。为了分离纤维素分解菌，在配制选择培养基时以

纤维素

纤维素

作为唯一碳源；从代谢类型分析，培养反刍动物胃中的纤维素分解菌时，必须提供无氧环境的原因是

动物胃中的纤维素分解菌为异养厌氧型，在无氧条件下才能存活

动物胃中的纤维素分解菌为异养厌氧型，在无氧条件下才能存活

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（2）在筛选纤维素分解菌时，可在培养基中加入

刚果红

刚果红

染料，然后根据菌落周围是否产生

透明圈

透明圈

来筛选目的菌株。
（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是

接种环

接种环

。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是

接种环灼烧未冷却划线（或未从第一区域末端开始）

接种环灼烧未冷却划线（或未从第一区域末端开始）

。
（4）初步筛选后，还需进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶活性的测定方法一般是

对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定

对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定

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