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Sanger法DNA测序技术的核心原理：由于双脱氧核苷酸（ddNTP）的2'和3'都不含羟基，其在DNA的合成过程中不能形成磷酸二酯键，因此可以中断DNA分子合成反应。在四个含有4种脱氧核苷酸（dNTP）的DNA体外合成反应体系中分别加入一定比例带有放射性同位素标记的ddNTP（分别为：ddATP，ddCTP，ddGTP和ddTTP），在PCR过程中复制随机终止，产生四组不同长度的一系列终止处带有标记的DNA片段。然后在变性凝胶（加入尿素等碱性物质）上进行电泳和放射自显影后，可以根据电泳带的位置确定待测分子的DNA序列，具体过程见图。
注：ddA是ddATP的缩写形式。
（1）如图1中Ⅰ过程横线①中应该加入的物质是耐高温的DNA聚合酶耐高温的DNA聚合酶，dNTP中dATP与ATP在组成上的区别是dATP中五碳糖为脱氧核糖、ATP中五碳糖为核糖dATP中五碳糖为脱氧核糖、ATP中五碳糖为核糖，为什么该过程中需要添加引物？
（2）材料中提到“在变性凝胶上进行电泳……”，请解释“变性”破坏DNA分子中的氢键，获得单链破坏DNA分子中的氢键，获得单链，为什么要变性处理？避免模板链对结果的影响避免模板链对结果的影响。
（3）如果电泳结果如图2所示，请写出待测DNA分子的序列
。
（4）某同学要通过PCR技术获得被32P标记且以碱基“C”为末端、不同长度的子链DNA片段，在反应管中已经有模板、引物、酶和相应缓冲液等等，还需加入哪些原料dATP、dGTP、dTTP、ddCTPdATP、dGTP、dTTP、ddCTP。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定；目的基因的筛选与获取．
【答案】耐高温的DNA聚合酶；dATP中五碳糖为脱氧核糖、ATP中五碳糖为核糖；破坏DNA分子中的氢键，获得单链；避免模板链对结果的影响；；dATP、dGTP、dTTP、ddCTP
；dATP、dGTP、dTTP、ddCTP【解答】
【点评】
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发布：2024/10/26 17:0:2组卷：18引用：1难度：0.7
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1．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
2．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：4引用：3难度：0.7
