玉米具有一定抗盐碱能力和抗低温能力，这与其抗逆性基因M有关。为研究基因M转入水稻后在逆境胁迫应答中的重要作用，科学家做了如下实验：首先将基因M和绿色荧光蛋白基因重组得到目的基因，该基因的两端同时拥有HindⅢ和BamHⅠ切点，随后将目的基因导入水稻并测定了基因M在水稻中的表达水平。
（1）当用图1所示质粒与目的基因构建重组质粒时，最合适的限制酶是 BamHIBamHI。
（2）根据图2，宜选择玉米的 叶叶（填器官名称）提取mRNA，然后在体外通过 逆转录（或反转录）逆转录（或反转录）的方式获得玉米抗逆性基因M，再用 PCRPCR技术扩增，该技术的简要步骤是 变性、复性、延伸变性、复性、延伸。
（3）将重组质粒导入水稻幼胚，加入含有 潮霉素潮霉素的培养基筛选，提取培养后的水稻幼胚DNA，设计引物对目的基因进行电泳鉴定，通过图3结果可知1、6、7、9、10、111、6、7、9、10、11号水稻材料已成功插入目的基因。研究人员又用显微镜观察转基因水稻细胞，发出绿色荧光的相应植株为目的植株，依据图4结果，后续还需进行的实验步骤为 将目的植株移栽到常温、一定浓度梯度的NaCl溶液中继续培养，筛选出耐盐效果最佳的植株将目的植株移栽到常温、一定浓度梯度的NaCl溶液中继续培养，筛选出耐盐效果最佳的植株。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】BamHI；叶；逆转录（或反转录）；PCR；变性、复性、延伸；潮霉素；1、6、7、9、10、11；将目的植株移栽到常温、一定浓度梯度的NaCl溶液中继续培养，筛选出耐盐效果最佳的植株
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/7 8:0:9组卷：8引用：3难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
