矮化育种能使水稻等作物品种具有抗倒伏和高产的优良特性,但同时会引起所育品种的氮肥利用率降低。研究发现,提高NGR5基因表达量既能保持矮化特征,又可以提高氮肥的利用率。为了进一步研究NGR5蛋白提高氮肥利用率的作用机制,研究人员利用酵母菌进行相关实验。回答下列问题。
(1)酵母菌需要转录因子(一类蛋白质)才能开始转录过程,某种转录因子由BD(DNA 结合结构域)和 AD(转录激活结构域)两部分组成,在具备相应条件时,BD与AD会靠拢并结合,激活特定基因的转录。据此推测,BD能识别特定基因前段的 碱基序列碱基序列 并与之结合,但不能激活转录过程,
(2)研究人员将NGR5基因连接到含有编码BD多肽基因的表达载体中,随后使用一定方法处理酵母菌细胞,并将该表达载体导入其中,使其能表达 BD-NGR5融合蛋白BD-NGR5融合蛋白。
(3)提取水稻根部细胞的RNA,通过 PCR扩增PCR扩增 过程获得大量的各种cDNA,随后将不同的cDNA片段连接到含有编码AD多肽基因的表达载体中,并导入上述酵母菌细胞,使其能表达不同的AD-Xn融合蛋白(“Xn”表示不同cDNA片段表达的多肽)。
(4)若Xn能与NGR5蛋白相互作用,则AD-Xn融合蛋白和BD-NGR5融合蛋白就会被牵引靠拢,促使BD与AD结合,激活标记基因的表达。这能使酵母菌将培养基中的某特殊物质转化为蓝色,因此可选择 变蓝变蓝 的菌落进行继续研究。
(5)为寻找能与NGR5蛋白相互作用的蛋白质,研究人员最终完成的实验如表所示,设置3个对照组的目的分别是 确保BD与AD之间、BD-NGR5与AD之间、BD与AD-Xn之间不会相互作用确保BD与AD之间、BD-NGR5与AD之间、BD与AD-Xn之间不会相互作用。
组别 | 表达的蛋白(多肽)1 | 表达的蛋白(多肽)2 |
对照组1 | BD | AD |
对照组2 | BD-NGR5 | AD |
对照组3 | BD | AD-Xn |
实验组 | BD-NGR5 | AD-Xn |
【答案】碱基序列;BD-NGR5融合蛋白;PCR扩增;变蓝;确保BD与AD之间、BD-NGR5与AD之间、BD与AD-Xn之间不会相互作用
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:30引用:2难度:0.7
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