内皮素（ET）是一种多肽，主要通过与靶细胞膜上的ET受体（ETA）结合而发挥生物学效应．科研人员通过构建表达载体，实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达，其过程如下图所示，图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为
，限制酶XhoⅠ的识别序列为
．请据图分析回答：
（1）进行过程①时，需要加入缓冲液、引物、dNTP和 反转录（逆转录）反转录（逆转录）酶等．完成过程①②③的目的是 获取目的基因（ETA基因）获取目的基因（ETA基因）．
（2）过程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使 磷酸二酯磷酸二酯键断开，形成的黏性末端是 
．
（3）构建的重组表达载体，目的基因上游的启动子是 RNA聚合酶识别和结合RNA聚合酶识别和结合的部位，进而可驱动基因的转录．除图中已标出的结构外，基因表达载体还应具有的结构是 终止子终止子．
（4）过程⑥要用CaCl2预先处理大肠杆菌，使其成为容易吸收外界DNA的 感受态感受态细胞．
（5）将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因，其目的是有利于检测 ETA基因能否表达及表达量ETA基因能否表达及表达量．
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】反转录（逆转录）；获取目的基因（ETA基因）；磷酸二酯；；RNA聚合酶识别和结合；终止子；感受态；ETA基因能否表达及表达量
；RNA聚合酶识别和结合；终止子；感受态；ETA基因能否表达及表达量【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：305引用：8难度：0.5
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