科学家利用逆转录病毒将Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4四个细胞中的转录因子基因转入小鼠成纤维细胞中,然后在培养ES细胞的培养基上培养这些细胞。2-3周后,这些细胞显示出ES细胞的形态,具有活跃的分裂、分化能力各方面都与ES细胞相似,它们就是iPS细胞。回答下列问题:
(1)Klf4的化学本质是 DNADNA。如要在体外对Klf4进行扩增需要使用PCR技术,在其体外扩增的过程中需要在扩增体系中加入的 耐高温的DNA聚合耐高温的DNA聚合酶。若要鉴定PCR产物是否是Klf4,可以采取 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳技术鉴定。
(2)将Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4转入小鼠成纤维细胞中时逆转录病毒起到 载体载体的作用。与成体干细胞相比,iPS细胞不具有 组织特异性组织特异性,具有分化成各种组织或细胞的潜能。
(3)若将胰岛损伤的糖尿病病人的皮肤成纤维细胞诱导成iPS细胞,再将它转化成胰岛B细胞,将这些胰岛B细胞移植到病人体内,否否(填“是”/“否”)会引起免疫排斥反应。分析原因 诱导过程中细胞中的遗传物质没有发生变化,理论上产生的还是“自体”细胞 (诱导过程中细胞中的遗传物质没有发生变化,细胞抗原性特相同/诱导过程中细胞中的遗传物质没有发生变化,细胞HLA相同)诱导过程中细胞中的遗传物质没有发生变化,理论上产生的还是“自体”细胞 (诱导过程中细胞中的遗传物质没有发生变化,细胞抗原性特相同/诱导过程中细胞中的遗传物质没有发生变化,细胞HLA相同)。
(4)实验证明iPS细胞的产生不是由培养基的作用造成的,为验证该结论设计了对照实验,请写出该实验的实验思路 将转入外源基因和没转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中,并确保其他培养条件相同,观察两组转化成iPS细胞的情况将转入外源基因和没转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中,并确保其他培养条件相同,观察两组转化成iPS细胞的情况。如果要了解Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4在诱导iPS细胞产生时,每个基因作用的相对大小,需要设计 55组实验。
【考点】干细胞的培养及其应用;DNA片段的扩增与电泳鉴定.
【答案】DNA;耐高温的DNA聚合;琼脂糖凝胶电泳;载体;组织特异性;否;诱导过程中细胞中的遗传物质没有发生变化,理论上产生的还是“自体”细胞 (诱导过程中细胞中的遗传物质没有发生变化,细胞抗原性特相同/诱导过程中细胞中的遗传物质没有发生变化,细胞HLA相同);将转入外源基因和没转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中,并确保其他培养条件相同,观察两组转化成iPS细胞的情况;5
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:14引用:2难度:0.5
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