玉米是我国重要的粮食作物和饲料来源，低温会影响玉米的产量和品质。研究者将从微生物中获得的CSP（冷激蛋白）基因与玉米基因的ubi启动子相连后构建基因表达载体，并将其导入玉米细胞中，获得了具有低温耐受性的玉米植株，如图1所示。请回答：
（1）研究者提取玉米的DNA，可利用PCRPCR技术将ubi启动子扩增出来。图1所示过程①需限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶的催化，获得的ubi-CSP基因在构建基因表达载体时须插入到T-DNA片段中的原因是只有T-DNA片段可整合到植物的染色体上只有T-DNA片段可整合到植物的染色体上。
（2）过程②需要用CaCl2溶液CaCl2溶液处理农杆菌以利于重组DNA的导入。影响过程③的因素主要有农杆菌的种类、外植体的类型及状态、共培养的时间等农杆菌的种类、外植体的类型及状态、共培养的时间等，一般来说只有处于细胞周期S期S期（时期）的细胞才具有被转化的能力。为了减小农杆菌对愈伤组织再分化的影响，需要在培养基中添加抗生素抗生素。
（3）研究者分别提取了野生型玉米及5株转基因玉米的染色体DNA，用限制性核酸内切酶处理后进行电泳。电泳后的DNA与基因探针进行杂交，得到图2所示放射性检测结果，该结果表明第1、2、4、51、2、4、5株CSP基因已整合到玉米染色体基因组。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】PCR；限制酶和DNA连接酶；只有T-DNA片段可整合到植物的染色体上；CaCl2溶液；农杆菌的种类、外植体的类型及状态、共培养的时间等；S期；抗生素；1、2、4、5
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：24引用：1难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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