玉米是重要的粮食作物，其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白的转基因玉米，回答下列问题。
（1）利用PCR技术以图1中的DNA片段为模板扩增P基因，需要的引物有 BCBC（从A、B、C、D四种单链DNA片段中选择）。
（2）培育超量表达P蛋白的转基因玉米过程中所用DNA片段和T顶质粒的酶切位点如图2所示（Ti质粒上的T-DNA可转移到被侵染的细胞，并整合到该细胞的染色体DNA上）。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用 BamHⅠ和SacⅠBamHⅠ和SacⅠ酶组合，理由是 能将P基因和强启动子完整切割，且在与Ti质粒连接的过程中可避免自身环化等问题能将P基因和强启动子完整切割，且在与Ti质粒连接的过程中可避免自身环化等问题；不选用图中其它限制酶的原因是 EcoRⅠ和NotⅠ会破坏P基因，HindⅢ会将强启动子和P基因分离EcoRⅠ和NotⅠ会破坏P基因，HindⅢ会将强启动子和P基因分离。
（3）将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养，培养基中需加入 潮霉素潮霉素（填潮霉素/卡那霉素/潮霉素或卡那霉素）进行筛选。
（4）P蛋白在玉米株系的表达量如图3所示，可作为超量表达p蛋白转基因玉米的生理特性研究实验材料的有 a1 a2 a3a1 a2 a3。
【答案】BC；BamHⅠ和SacⅠ；能将P基因和强启动子完整切割，且在与Ti质粒连接的过程中可避免自身环化等问题；EcoRⅠ和NotⅠ会破坏P基因，HindⅢ会将强启动子和P基因分离；潮霉素；a1 a2 a3
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：8引用：2难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
