基因工程可以赋予生物新的性状,科研人员利用基因工程技术以期待获得具备抗旱特性的小麦。请回答下列问题:
(1)研究发现,某些植物的种子脱水数十年后复水仍能够恢复活性,原因是细胞中积累海藻糖。科研人员拟将酵母菌的海藻糖合成酶基因(TPS)转入小麦中。图标注了载体TPS基因的酶切位点和预期的基因表达载体的结构,表格列举了限制酶的识别序列。
酶 | 识别序列 |
BamHⅠ | 5′GGATCC3′ |
SacⅠ | 5′GAGCTC3′ |
HindⅢ | 5′AAGCTT3′ |
XbaⅠ | 5′TCTAGA3′ |
DNA连接
DNA连接
酶将TPS基因拼接到载体的切口处,形成基因表达载体。②从图分析,在TPS基因两侧引入的是
BamHI、SacI
BamHI、SacI
限制酶的酶切位点。设计的引物序列为 5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT
5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT
。(2)图中Bar基因是抗除草剂基因。基因表达载体转入细胞后,在获得的植株叶片上涂抹除草剂,筛选出7株抗除草剂个体。Bar基因作为载体上的
标记
标记
基因辅助筛选TPS转基因植株。(3)现对筛选出的抗除草剂个体进行DNA水平的检测。请填写表格,完成实验设计:
组别 | 植株编号1-7 | 对照组1 | 对照组2 |
模板 | ① (提取的)1-7号植株DNA (提取的)1-7号植株DNA |
基因表达载体或TPS基因片段 | ② 空质粒载体 空质粒载体 |
PCR体系中其他物质 | 扩增缓冲液、水、引物、③ 4种脱氧核苷酸(或dNTP) 4种脱氧核苷酸(或dNTP) 、④Taq酶 Taq酶 |
||
电泳预期结果 | ⑤ 有条带 有条带 |
有条带 | 没有条带 |
RR
RR
。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】DNA连接;BamHI、SacI;5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT;标记;(提取的)1-7号植株DNA;空质粒载体;4种脱氧核苷酸(或dNTP);Taq酶;有条带;RR
【解答】
【点评】
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发布:2024/8/9 8:0:9组卷:82引用:8难度:0.6
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