科研人员利用基因工程构建了超量表达蛋白的转基因玉米。在超量表达X基因载体的构建中，所用的含目的基因的DNA片段和根瘤农杆菌Ti质粒的酶切位点如图1所示，其中强启动子具有结合RNA聚合酶且能多次启动转录的功能；X蛋白在不同玉米株系的表达量如图2所示。回答下列问题：
（1）为使X基因在玉米植株中超量表达，应优先选用 BamHⅠ和SacⅠBamHⅠ和SacⅠ酶组合，将目的基因片段插入T-DNA区段，其中T-DNA的作用是 T-DNA可以将强启动子和X基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上T-DNA可以将强启动子和X基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。
（2）可在农杆菌培养基中加入卡那霉素以筛选 成功导入超量表达X基因载体成功导入超量表达X基因载体的农杆菌，得到的农杆菌与玉米愈伤组织混合培养，在接下来的筛选过程中，除了以X基因为模板设计探针进行DNA分子杂交外，还可以通过 在培养基中添加潮霉素/以X基因为模板设计探针与X基因mRNA杂交/以X蛋白为抗体，获得特异性抗原探针，以愈伤组织表达的X蛋白杂交在培养基中添加潮霉素/以X基因为模板设计探针与X基因mRNA杂交/以X蛋白为抗体，获得特异性抗原探针，以愈伤组织表达的X蛋白杂交鉴别导入T-DNA序列的愈伤组织。
（3）筛选出的愈伤组织经过诱导，分化成 芽和根的分生组织（丛状苗或幼苗）芽和根的分生组织（丛状苗或幼苗），最终获得多个转基因玉米株系。在诱导形成愈伤组织和愈伤组织再分化形成植株过程需要更换新的培养基，原因是：这两个过程所需的营养物质和植物生长调节剂配比不同这两个过程所需的营养物质和植物生长调节剂配比不同。待生根后，将苗移栽至蛭石中，逐渐 降低环境湿度降低环境湿度进行炼苗。
（4）不同转基因玉米株系中X蛋白表达量差异性可能与 目的基因在染色体上的插入次数/目的基因在染色体上的插入位置/强启动子是否丟失/受体RNA聚合酶表达量差异/目的基因是否导入受体细胞目的基因在染色体上的插入次数/目的基因在染色体上的插入位置/强启动子是否丟失/受体RNA聚合酶表达量差异/目的基因是否导入受体细胞有关。（答出两点即可）
【考点】植物的组织培养．
【答案】BamHⅠ和SacⅠ；T-DNA可以将强启动子和X基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上；成功导入超量表达X基因载体；在培养基中添加潮霉素/以X基因为模板设计探针与X基因mRNA杂交/以X蛋白为抗体，获得特异性抗原探针，以愈伤组织表达的X蛋白杂交；芽和根的分生组织（丛状苗或幼苗）；这两个过程所需的营养物质和植物生长调节剂配比不同；降低环境湿度；目的基因在染色体上的插入次数/目的基因在染色体上的插入位置/强启动子是否丟失/受体RNA聚合酶表达量差异/目的基因是否导入受体细胞
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：11引用：1难度：0.7
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