科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草，培育过程如图1所示，表格所示为相关限制酶识别序列及切制位点。回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	BclⅠ	Sau3AⅠ	HindⅢ
识别序列及切割位点	G↓GATCC CCTAG↑G	T↓GATCA ACTAG↑T	↓GATC CTAG↑	A↓AGCTT TTCGA↑A

（1）表中Sau3AI酶切的DNA末端与BamHI酶切的DNA末端连接，该连接序列

不一定能

不一定能

（填“能”、“不能“或“不一定能“）被BamHI酶识别。质粒和目的基因构建重组质粒时，应选用图1中

BamHI和HindⅢ

BamHI和HindⅢ

两种限制酶切割。
（2）若通过PCR技术扩增抗盐基因，除了模板外还需提供

（两种）引物、耐高温的DNA聚合酶、原料（4种脱氧核苷酸）

（两种）引物、耐高温的DNA聚合酶、原料（4种脱氧核苷酸）

等物质。
（3）步骤①构建的基因表达载体，除图I中质粒所示结构外，还需具有

启动子、终止子

启动子、终止子

  及目的基因：步骤②中需先用

Ca²⁺

Ca²⁺

处理农杆菌以便将重组质粒导入农杆菌细胞。
（4）基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，图2表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基中除了含有农杆菌生长繁殖所必需的成分外，A培养基还需加入

四环素

四环素

，B培养基还需加入

氨苄青霉素（或氨苄青霉素和四环素）

氨苄青霉素（或氨苄青霉素和四环素）

从而达到筛选目的。从检测筛选的结果分析，含目的基因的是菌落

4和6

4和6

（填数字） 中的细菌。