现有重组质粒甲(共含2686个碱基对,不含T-DNA)和乙,为避免基因反接,研究人员用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割重组质粒甲、乙,再利用所得片段构建了重组质粒丙(如图所示),然后采用农杆菌转化法将丙导入胡萝卜愈伤组织细胞。培养后得到转VP1基因胡萝卜植株。请回答:
(1)构建重组质粒丙的目的是将VP1基因插入到T-DNAT-DNA中,从而使VP1基因进入植物细胞后,能整合到染色体的DNA上。利用重组质粒甲、乙构建丙的过程中,用到的工具酶是限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA连接酶限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA连接酶。
(2)将重组质粒甲、乙和丙进行分组,每组只含其中一种重组质粒,同时用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割,结果如表所示:
组别 | 切割后所得DNA片段的情况 |
第1组 | 只得到含有2146和540个碱基对的2种DNA片段 |
第2组 | 只得到含有540和12400个碱基对的2种DNA片段 |
第3组 | 只得到含有12400和1000个碱基对的2种DNA片段 |
0
0
个游离的磷酸基团,限制酶Ⅰ在重组质粒甲中有1
1
个切割位点,表中第2
2
组是切割重组质粒丙的结果。(3)在植物组织培养过程中需要无菌操作,因此对外植体(离体的组织块)要进行
消毒
消毒
处理。用于培养外植体的培养基不适用于培养胚状体,原因是培养基中添加的植物激素(植物生长调节剂)的种类和含量比例有所不同
培养基中添加的植物激素(植物生长调节剂)的种类和含量比例有所不同
。【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】T-DNA;限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA连接酶;0;1;2;消毒;培养基中添加的植物激素(植物生长调节剂)的种类和含量比例有所不同
【解答】
【点评】
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