PCR是聚合酶链式反应的缩写，是一项在体外提供参与DNA复制的组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。如图为PCR获取并扩增目的基因的示意图，引物的3端有结合模板DNA的关键碱基，5′端碱基无严格限制。据图回答下列问题：
（1）PCR的原理是 DNA半保留复制DNA半保留复制，PCR过程中所用的酶是 耐高温DNA聚合酶（Taq酶）耐高温DNA聚合酶（Taq酶）。
（2）PCR的每次循环一般包括 变性、复性、延伸变性、复性、延伸三步，在PCR过程中，新合成的DNA子链的延伸方向是 5’→3’5’→3’，PCR获取目的基因时；在第 33次循环后反应体系中可出现目的基因。
（3）PCR获取目的基因时，引物的作用是 界定目的基因，为DNA聚合酶提供结合位点并使DNA聚合酶能够从引物的3’端连接脱氧核苷酸界定目的基因，为DNA聚合酶提供结合位点并使DNA聚合酶能够从引物的3’端连接脱氧核苷酸。为了方便目的基因与质粒的连接，可在引物的5’5’端添加限制酶识别序列。若引物上的限制酶识别序列为CCC↓GGG，在用一种酶连接目的基因与质粒时，所用的酶为 T4DNA连接酶T4DNA连接酶。
（4）科学设计引物是PCR能否成功的关键。若引物的碱基过多或引物的G、C含量过高，会造成PCR的效率偏低，收获的目的基因较少，原因是 引物与模板链结合过于紧密，变性时引物不易与模板链脱离（影响变性）引物与模板链结合过于紧密，变性时引物不易与模板链脱离（影响变性）。若对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，结果发现有两个或多个条带，从引物角度分析，原因可能是 引物过短导致引物的特异性下降引物过短导致引物的特异性下降。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】DNA半保留复制；耐高温DNA聚合酶（Taq酶）；变性、复性、延伸；5’→3’；3；界定目的基因，为DNA聚合酶提供结合位点并使DNA聚合酶能够从引物的3’端连接脱氧核苷酸；5’；T4DNA连接酶；引物与模板链结合过于紧密，变性时引物不易与模板链脱离（影响变性）；引物过短导致引物的特异性下降
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：8引用：1难度：0.6
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1．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
2．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：3引用：3难度：0.7
