自然界中某些细菌可通过代谢将原油转化为稳定无害的终产物,科学家为获得能有效修复原油污染土壤的工程菌展开相关研究。
(1)获得能降解原油的目标菌可从原油污染土壤原油污染土壤取样,样品经无菌水无菌水(无菌水/蒸馏水)稀释后涂布于以原油为唯一碳源的固体培养基上培养,分离纯化后获得目标菌A。
(2)目标菌A成膜性差,不能有效控制原油向深层土壤渗透。研究人员将假单胞菌的bdlA基因(约1300bp)导入目标菌A体内,尝试构建成膜性好的工程菌。
①假单胞菌遭受环境压力时,会分泌大量胞外复合物将自身包裹于其中形成细菌聚集膜样物(生物被膜),体现了生物对环境的适应适应。
②图1为bdlA基因与pX系列质粒连接构建的重组质粒模式图,为初步检测构建是否成功,可选用限制酶Csp45I、XbaICsp45I、XbaI对其切割,并对酶切产物及重组质粒进行凝胶电泳检测,结果如图2。据图2可初步判断重组质粒构建成功,依据是连接到两个质粒上的目的基因一致连接到两个质粒上的目的基因一致。

(3)上述方法获得的两种工程菌命名为KT2和KT5,在不同时间测定实验组中工程菌及对照组中导入普通质粒的目标菌A导入普通质粒的目标菌A的生物被膜总量相对值,结果如图3所示。该结果表明在36t/h时KT2和KT5两种工程菌的生物被膜量相对值显著提高在36t/h时KT2和KT5两种工程菌的生物被膜量相对值显著提高。

(4)若要将以上工程菌用于原油污染土壤的修复,举一例说明下一步还应进行哪些方面的研究如何扩大培养如何扩大培养?
【考点】基因工程的基本操作程序.
【答案】原油污染土壤;无菌水;适应;Csp45I、XbaI;连接到两个质粒上的目的基因一致;导入普通质粒的目标菌A;在36t/h时KT2和KT5两种工程菌的生物被膜量相对值显著提高;如何扩大培养
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:36引用:2难度:0.6
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