[选修1：生物技术实践]
甘肃某地由于TNT（主要成分为2，4-二硝基甲苯磺酸盐）红水蒸发池渗漏，对土壤造成严重污染，威胁到黄河上游的水质安全。因此，TNT红水污染土壤修复是目前亟待解决的环境问题。某实验小组欲通过生物修复分离有效降解2，4-二硝基甲苯磺酸盐的菌株，进行了如下实验，请回答下列问题：
（1）LB培养基的制备：取胰蛋白胨、NaCl和酵母提取物溶于蒸馏水中，此过程中胰蛋白胨提供的营养物质是 碳源和氮源碳源和氮源，用NaOH调节pH至7.2，用 高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅在121℃条件下灭菌15分钟。若要获得本研究所用的固体培养基，需在上述培养基中加入 琼脂琼脂。
（2）菌株分离与鉴定：取 甘肃某TNT红水污染场地甘肃某TNT红水污染场地土壤，放入装有100mL无菌LB液体培养基的锥形瓶中，在30℃和120rpm的恒温摇床上振荡24小时，此过程的目的是 富集培养富集培养。取1mL培养液，采用 稀释涂布平板稀释涂布平板法分离纯化菌株。
（3）该实验小组欲进一步探究菌株对2，4-二硝基甲苯磺酸盐的降解能力，请帮助设计实验，写出实验思路：取人工配制的一定浓度的2，4二硝基甲苯磺酸盐（TNT）溶液加入锥形瓶中，之后再在锥形瓶中加入一定量的纯化菌液每隔一定时间取样，测定2，4二硝基甲苯磺酸盐浓度取人工配制的一定浓度的2，4二硝基甲苯磺酸盐（TNT）溶液加入锥形瓶中，之后再在锥形瓶中加入一定量的纯化菌液每隔一定时间取样，测定2，4二硝基甲苯磺酸盐浓度。
（4）探究盐度对菌株生长的影响研究发现，纯化的菌株在NaCl浓度为0%～3%之间对2，4-二硝基甲苯磺酸盐的降解率在96小时后达到90%，但当NaCl浓度达到5%后，降解率几乎为0。研究中偶然发现菌株B1在NaCl浓度达到5%后，降解率却达到50%，说明 菌株B具有一定的耐盐能力能在较高盐浓度条件下降解2，4二硝基甲苯磺酸盐菌株B具有一定的耐盐能力能在较高盐浓度条件下降解2，4二硝基甲苯磺酸盐。
【答案】碳源和氮源；高压蒸汽灭菌锅；琼脂；甘肃某TNT红水污染场地；富集培养；稀释涂布平板；取人工配制的一定浓度的2，4二硝基甲苯磺酸盐（TNT）溶液加入锥形瓶中，之后再在锥形瓶中加入一定量的纯化菌液每隔一定时间取样，测定2，4二硝基甲苯磺酸盐浓度；菌株B具有一定的耐盐能力能在较高盐浓度条件下降解2，4二硝基甲苯磺酸盐
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：5引用：1难度：0.7
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1．回答下列关于微生物的问题．
阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．
（1）为获得单菌落，可采用平板划线法或法将初筛菌液接种在培养基上．46SM01菌落为粉白色，初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是有细胞核，且有分生孢子．SM01还一定具有的结构有（多选）．
A．细胞膜 B．核糖体 C．拟核 D．荚膜
（2）表中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
①缺少，SM01不能很好生长
②具有，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
③缺乏，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定．
表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L发布：2025/1/2 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（ ）
发布：2024/12/31 4:0:1组卷：17引用：3难度：0.7 -
3．为了防治大气污染，烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题．研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，并了解其生长规律，进行了如下操作．请回答下列问题：
（1）采样与细菌的筛选：在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到采集土样．为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌，可以通过增加脱硫菌的浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中，边搅拌边持续通入SO2气体几分钟，然后接种到培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO2的时间，同时逐步降低培养基的pH．此操作的目的是分离出的脱硫细菌．
（3）培养与观察：一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），驯化后的脱硫细菌表现出稳定的特征．用高倍显微镜（填“可以”或“不可以”）观察到脱硫细菌的核糖体．
（4）探究生长规律：在计数时，计数方法有稀释涂布平板法和直接计数法．在用稀释涂布平板法进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目．发布：2025/1/1 8:0:2组卷：6引用：2难度：0.5
