[选修3:现代生物科技专题]
研究发现,某些植物的种子脱水数十年后复水仍能够恢复活性,原因是细胞中积累了海藻糖。科研人员拟将酵母菌的海藻糖合成酶基因(TPS)转入小麦中。如图中标注了载体、Bar体记基因(抗除草剂基因)、TPS基因的酶切位点和预期的基因表达载体的结构。
科研人员利用PCR技术获得大量的TPS基因。现将2种引物的一侧添加限制酶识别序列(表格列举了限制酶的识别序列),这样TPS基因的PCR产物和载体用相同的限制酶切制后,可利用DNA连接酶将TPS基因拼接到载体的切口处,形成基因表达载体。
酶 | BamHⅠ | SacⅠ | HindⅢ | XbaⅠ |
识别序列 | 5′-GGATCC | 5′-GAGCTC | 5′-AAGCTT | 5′-TCTAGA |

(1)据图分析,在TPS基因两侧引入的是
BamHⅠ、SacⅠ
BamHⅠ、SacⅠ
限制酶的酶切位点。设计的引物序列为 5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT
5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT
。(2)在利用农杆菌转化法转入目的基因时,需将TPS基因插入到质粒的T-DNA中,原因是
T-DNA能转移并整合到小麦染色体DNA上
T-DNA能转移并整合到小麦染色体DNA上
。将携带了TPS基因的农杆菌和小麦薄壁组织细胞共同培养时,需用酚类化合物对小麦细胞进行处理,这种处理的作用是 吸引农杆菌对小麦细胞进行侵染
吸引农杆菌对小麦细胞进行侵染
。(3)为了鉴别受体细胞中是否含有TPS基因,基因表达载体转入细胞后,在获得的小麦植株叶片上涂抹
除草剂
除草剂
(填“除草剂”或“海藻糖“),筛选出抗除草剂个体。科学家将生长健壮、苗龄一致的抗除草剂小麦植株(实验组)与非抗除草剂小麦植株(对照组)进行培育,鉴定两组个体之间的 海藻糖
海藻糖
(填“除草剂”或“海藻糖”)的含量,如果 实验组积累的海藻糖明显高于对照组
实验组积累的海藻糖明显高于对照组
,则说明获得了细胞中积累了海藻糖的小麦优质品种。【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】BamHⅠ、SacⅠ;5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT;T-DNA能转移并整合到小麦染色体DNA上;吸引农杆菌对小麦细胞进行侵染;除草剂;海藻糖;实验组积累的海藻糖明显高于对照组
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:3引用:3难度:0.6
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