结直肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤，研究表明80%患者的A基因（肿瘤抑制基因）突变，而患者逐渐年轻化被认为与昼夜节律紊乱有关。研究人员对昼夜节律紊乱、A基因突变与肿瘤发生三者之间的联系展开研究。
（1）A基因突变产生A^-基因，A^-表达的错误蛋白不行使正常功能且会干扰正常A蛋白发挥作用。科研人员利用Cre-loxP系统构建易患结直肠癌的A基因杂合突变模型鼠，且只允许突变基因A^-在该鼠的肠上皮细胞表达。

①图1所示的Cre-loxP系统的工作原理为：利用

限制

限制

酶和DNA连接酶在启动子和目标基因间插入loxP-Stop-loxP序列，目标基因不转录。Cre酶可识别loxP序列并切割DNA分子，敲除

Stop（和一个loxP）

Stop（和一个loxP）

序列，目标基因转录。
②欲获得A基因杂合突变模型鼠，研究人员需对野生型甲鼠和乙鼠分别转基因，从甲、乙杂交后代中筛选目标个体。请依据图1原理设计出导入甲鼠和乙鼠的基因及其调控序列

（填写选项前的字母）。
a.A（A^-）基因的启动子
b.使基因只在肠上皮细胞表达的启动子
c.loxP-Stop-loxP
d.A基因
e.A^-基因
f.Cre酶基因
（2）科研人员又获得了节律基因B纯合突变的模型鼠和A基因杂合突变、B基因纯合突变的双突变模型鼠，观察野生型（WT）与各模型鼠的肠道肿瘤生长情况（图2）。
①据图2分析，A、B基因与结直肠癌发生的关系可表述为

B的突变可加强A突变对结直肠癌发生的促进作用

B的突变可加强A突变对结直肠癌发生的促进作用

。
②检测发现双突变模型鼠的A基因mRNA含量几乎为0，说明

B基因突变抑制A基因的转录（或表达）

B基因突变抑制A基因的转录（或表达）

。
（3）A基因表达的A蛋白参与W为信号的调节通路（图3），该通路在结直肠癌发病机制中发挥重要作用。
①W与受体结合激活D蛋白，使

β蛋白降解复合物合成被抑制，β蛋白积累并进入细胞核与促增殖基因的转录因子结合

β蛋白降解复合物合成被抑制，β蛋白积累并进入细胞核与促增殖基因的转录因子结合

，促进促增殖基因表达，细胞快速增殖。
②科研人员从（2）的1～4组小鼠小肠中分离干细胞进行离体培养，培养基中含促进干细胞分泌W蛋白的因子。每组培养物分别用0、1、10和100nmol四个浓度的W合成抑制剂处理，预期各组细胞增殖速率的变化为

随W合成抑制剂浓度升高，1、2、3组增殖速率逐渐降低，4组无明显变化

随W合成抑制剂浓度升高，1、2、3组增殖速率逐渐降低，4组无明显变化

。