某单子叶作物甲不具有抗锈病的性状，科学家将某种生物的抗锈病基因分离出来，并将该基因导入作物甲体内，成功培育了抗锈病的新品种。图中EoRⅠ、BamHⅠ为两种限制酶，箭头所指为限制酶的酶切位点。已知作物甲细胞对四环素敏感，抗锈病基因可以通过EeoRⅠ或BamHⅠ获得。回答下列问题：
（1）应使用 DNA连接DNA连接酶和限制酶 EcoRIEcoRI（填“EcoRⅠ”或“BamHⅠ”）构建重组质粒，不使用另一种限制酶的理由是 BamHⅠ的酶切位点不在启动子和终止子之间BamHⅠ的酶切位点不在启动子和终止子之间。
（2）在获得抗锈病基因后，采用 PCRPCR技术在体外进行大量扩增，该技术的前提是需要有一段已知抗锈病基因的核苷酸序列，以便根据该序列合成 引物引物。
（3）将抗锈病基因导入作物甲的细胞中一般不适合采用农杆菌转化法，其原因最可能是 作物甲是单子叶植物，农杆菌不易感染单子叶植物作物甲是单子叶植物，农杆菌不易感染单子叶植物。
（4）为了初步检测作物甲的细胞中是否导入了抗锈病基因，可以在培养基中添加 四环素四环素，若在该培养基上作物甲细胞能增殖或不死亡，则说明作物甲细胞中 可能可能（填“一定”“可能”或“一定没有”）导入了抗锈病基因。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】DNA连接；EcoRI；BamHⅠ的酶切位点不在启动子和终止子之间；PCR；引物；作物甲是单子叶植物，农杆菌不易感染单子叶植物；四环素；可能
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：8引用：2难度：0.5
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
