胰岛素是动物体内合成的一种蛋白质,可以用于治疗糖尿病。将人的胰岛素的基因在大肠杆菌中进行表达,可以实现高效生产。
(1)导入大肠杆菌中的胰岛素基因取自人体细胞的 cDNA文库cDNA文库(填“基因组文库”或“cDNA文库”)。
(2)对胰岛素基因进行扩增需利用 PCRPCR技术,前提是要有 一段已知胰岛素基因的核苷酸序列一段已知胰岛素基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。扩增中的每一次循环可分为 变性—退火—延伸变性—退火—延伸三步。
(3)将胰岛素基因导入大肠杆菌细胞,最常用的转化方法是用 Ca2+Ca2+处理细胞,使其成为 感受态感受态细胞,进而完成转化过程。
(4)检测大肠杆菌中胰岛素基因是否翻译成胰岛素,方法是 抗原—抗体杂交抗原—抗体杂交,科学家从大肠杆菌中提取了胰岛素,但发现其并没有生物活性,从细胞结构的角度分析原因是 胰岛素是真核细胞蛋白质,大肠杆菌是原核细胞,没有内质网和高尔基体对真核细胞的蛋白质进行加工修饰胰岛素是真核细胞蛋白质,大肠杆菌是原核细胞,没有内质网和高尔基体对真核细胞的蛋白质进行加工修饰。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】cDNA文库;PCR;一段已知胰岛素基因的核苷酸序列;变性—退火—延伸;Ca2+;感受态;抗原—抗体杂交;胰岛素是真核细胞蛋白质,大肠杆菌是原核细胞,没有内质网和高尔基体对真核细胞的蛋白质进行加工修饰
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:0引用:1难度:0.7
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