如图1表示培育出转基因大肠杆菌的部分流程，图2是限制酶BamHⅠ和Sau3AⅠ识别的核苷酸序列及其切割位点。回答下列问题。
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：获取目的基因获取目的基因、构建基因表达的载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定。
（2）据图分析，若切割含目的基因的DNA和质粒时，均使用1种酶进行切割，则切割含目的基因的DNA使用的限制酶是 Smu3AⅠSmu3AⅠ，切割质粒使用的限制酶是 BamHⅠBamHⅠ。切割质粒不使用另一种限制酶的原因是 Sau3AⅠ会破坏标记基因Sau3AⅠ会破坏标记基因。进行图中①过程，除了用到限制酶以外，还需用到的酶是 DNA连接酶（或E．coliDNA连接酶或T4DNA连接酶）DNA连接酶（或E．coliDNA连接酶或T4DNA连接酶）。
（3）图1中②过程需用钙离子溶液处理大肠杆菌，目的是 使大肠杆菌处于容易从周围环境中吸收DNA的状态使大肠杆菌处于容易从周围环境中吸收DNA的状态。
（4）图1中③过程，需将大肠杆菌接种到含有氯霉素的培养基上，原因很可能是 CmR基因为氯霉素抗性基因CmR基因为氯霉素抗性基因。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】获取目的基因；目的基因的检测与鉴定；Smu3AⅠ；BamHⅠ；Sau3AⅠ会破坏标记基因；DNA连接酶（或E．coliDNA连接酶或T4DNA连接酶）；使大肠杆菌处于容易从周围环境中吸收DNA的状态；CmR基因为氯霉素抗性基因
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：6引用：1难度：0.7
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
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