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中国甜柿的自然脱涩与乙醛代谢关键酶基因(PDC)密切相关,推测涩味程度可能与PDC基因的表达情况有关。
(1)启动子位于基因首端,是RNA聚合酶识别和结合的位点,同时启动子区域还存在着许多调控蛋白的结合位点,RNA聚合酶和调控蛋白共同影响了基因的
转录水平
转录水平

(2)为筛选PDC基因的调控蛋白,科研人员进行了下列实验。
①PDC基因的启动子序列未知,为获得大量该基因启动子所在片段,可利用限制酶将基因组DNA进行酶切,然后在
DNA连接酶
DNA连接酶
的作用下将已知序列信息的接头片段连接在PDC基因的上游,根据
接头片段
接头片段
和PDC基因编码序列设计引物进行PCR.利用质粒A(图1)构建含有PDC基因启动子片段的重组质粒并导入代谢缺陷型酵母菌,用不含
尿嘧啶
尿嘧啶
的培养基可筛选出成功转化的酵母菌Y1H。

②质粒G(图2)上的AD基因表达出的AD蛋白与启动子足够靠近时,能够激活后续基因转录,因此需获得待测蛋白与AD蛋白的融合蛋白用于后续筛选。科研人员从中国甜柿中提取RNA,将逆转录形成的各种cDNA与质粒G连接后导入酵母菌,此时应选择质粒G中的位点
4
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(填序号1~5)作为cDNA的插入位点,最终获得携带不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
③重组酵母Y187与Y1H能够进行接合生殖,形成的接合子含有两种酵母菌质粒上的所有基因。若接合子能在含有金担子素的培养基中生存,则推测待测蛋白是PDC基因的调控蛋白,请结合图示阐述作出该推测的理由。

【答案】转录水平;DNA连接酶;接头片段;尿嘧啶;4
【解答】
【点评】
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发布:2024/11/11 0:0:2组卷:95引用:2难度:0.7
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    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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