为探究M基因的功能，科研人员将克隆得到的M基因导入拟南芥植株（自交繁殖），流程如下图所示。回答下列问题：
（1）研究人员获取了M基因的mRNA后，通过[a]逆转录逆转录（填名称）过程获得了M基因；然后通过[b]PCRPCR技术对其进行扩增。
（2）过程c获得重组质粒，需要使用的工具酶是 限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶。
（3）为获得转基因植物，本实验采用 农杆菌转化农杆菌转化法将重组质粒导入拟南芥，主要过程如下：
①过程d：将重组质粒导入农杆菌，得到含重组质粒的农杆菌菌液。
②过程e：在拟南芥植株产生大量花序时，将其花表面部分在农杆菌悬浮液中浸泡20～30s,3～4周后得到转化拟南芥植株的种子T。浸泡之前，需先剪去已经长成的角果（这些角果将来可发育成种子），原因是 已受精的角果将来结的种子是非转基因已受精的角果将来结的种子是非转基因。
③将收获的拟南芥T。种子，播种在含有 卡那霉素卡那霉素的培养基上，能的康生长的幼苗含有M基因。
（4）若采用上述方法获得的拟南芥细胞中只有一条DNA上含有M基因，则要进一步获得M基因稳定的转基因拟南芥植株，下一步操作是 自交自交。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】逆转录；PCR；限制酶和DNA连接酶；农杆菌转化；已受精的角果将来结的种子是非转基因；卡那霉素；自交
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/9 8:0:8组卷：0引用：3难度：0.6
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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