吴茱萸是一种中药，其主要成分为吴茱萸碱（EVO）。为研究EVO对人胃癌细胞增殖的影响及作用机制，科研人员做了以下实验。请回答问题：
（1）检测EVO对胃癌细胞BGC-823增殖的影响。
①用含动物血清的DME/F-12培养基置于恒温培养箱中培养BGC-823，动物血清的作用是提供生长因子（或补充培养基中动物细胞生长需要的未知营养）提供生长因子（或补充培养基中动物细胞生长需要的未知营养）。
②取出上述培养的细胞，加入胰蛋白酶制成单单细胞悬液，置于加入不同浓度EVO的多孔板中进行培养。
③EVO对BGC-823细胞增殖影响的实验结果如图1．实验结果表明吴茱萸碱抑制BGC-823细胞增殖；作用效果与作用时间和浓度呈正相关吴茱萸碱抑制BGC-823细胞增殖；作用效果与作用时间和浓度呈正相关。
（2）检测EVO对BGC-823细胞周期的影响，结果如下表。
细胞周期中各期的细胞比例
| 组别 | G0/G1期（%） | S期（%） | G2/M期（%） |
| 对照组 | 42.62 | 17.65 | 23.37 |
| EVO组 | 8.57 | 19.30 | 54.13 |
G2/M
G2/M
期。（3）检测EVO对BGC-823细胞周期和细胞凋亡相关蛋白表达的影响，结果如图2。
①根据上述实验，可判断
p53
p53
是细胞周期抑制蛋白，该蛋白能与细胞周期蛋白基因的启动子结合，抑制其转录
转录
，从而抑制BGC-823细胞周期的运行。②细胞凋亡蛋白Caspase-3表达量
上升
上升
，该蛋白参与细胞的程序性
程序性
死亡过程。（4）综上所述，推测EVO对人胃癌细胞的作用机制是
EVO通过促进细胞周期抑制蛋白p53基因表达，从而抑制细胞周期蛋白Cdc25C基因表达，诱导胃癌细胞阻滞于G2/M期，抑制胃癌细胞增殖；同时，EVO促进细胞凋亡蛋白Caspase-3基因表达，促进胃癌细胞凋亡
EVO通过促进细胞周期抑制蛋白p53基因表达，从而抑制细胞周期蛋白Cdc25C基因表达，诱导胃癌细胞阻滞于G2/M期，抑制胃癌细胞增殖；同时，EVO促进细胞凋亡蛋白Caspase-3基因表达，促进胃癌细胞凋亡
。【考点】细胞增殖的意义和细胞周期．
【答案】提供生长因子（或补充培养基中动物细胞生长需要的未知营养）；单；吴茱萸碱抑制BGC-823细胞增殖；作用效果与作用时间和浓度呈正相关；G2/M；p53；转录；上升；程序性；EVO通过促进细胞周期抑制蛋白p53基因表达，从而抑制细胞周期蛋白Cdc25C基因表达，诱导胃癌细胞阻滞于G2/M期，抑制胃癌细胞增殖；同时，EVO促进细胞凋亡蛋白Caspase-3基因表达，促进胃癌细胞凋亡
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：80引用：4难度：0.5
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1．细胞从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期，以下为细胞周期的几种检测方法，分析回答相关问题。
（1）BrdU渗入测定细胞周期的方法：BrdU加入培养基后，可做为细胞DNA复制的原料。若 DNA-条单链渗入了BrdU时，染色体表现为深色，若DNA两条单链均渗入了BrdU时，染 色体表现为浅色。细胞如果处于第一个周期的中期，则细胞中每条染色体均有条单体为深色。细胞如果处于第三个周期的中期，则由同一细胞分裂所得所有细胞中全部染色体中，两条单体均为浅色的染色体占的比例为。统计分裂中各期比例，就可算出细胞周期的值。
（2）同位素标记法测定细胞周期：为测定某种细胞分裂的细胞周期，利用3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸短暂培养该种细胞一段时间后，处于S期的细胞都会被标记。洗脱含放射性同位素的胸腺嘧啶脱氧核苷酸，再换用无放射性的新鲜培养液培养，定期检测。不同间隔时间取样，结果如图1所示。
A：处于S期的细胞都被3H标记；B：被标记细胞最早进入分裂期；C：50%分裂期细胞被标证且在增加；D：50%分裂期细胞被标记且在减少；E：出现被标记细胞第二次进入分裂期。则这种细胞的S期为h。
（3）流式细胞仪PI染色法：由于细胞周期各时相的DNA含量不同，PI可以与DNA结合，其荧光强度直接反映了细胞内DNA含量。因此，通过流式细胞仪PI染色法对细胞内DNA含量送行检测，可以将细胞周期各时期区分开来，获得流式DNA含量图进而计算出细胞周期的值。
图2为某二倍体生物（2N）细胞周期测定所得流式DNA含量图，图中b点对应的细胞染色体数目为（填“2N”、“4N”或“2N或4N”），与对照组相比，实验组可能是经过了处理（填“DNA合成抑制剂”或“秋水仙素”）。发布：2025/1/3 8:0:1组卷：52引用：1难度：0.5 -
2．细胞周期包括分裂间期（分为G1期、S期和G2期）和分裂期（M期）。如图1标注了甲动物肠上皮细胞的细胞周期各阶段的时长及DNA含量。图2为用某抗癌药物处理体外培养的该动物的癌细胞，24小时后用液式细胞仪（可根据细胞中DNA含量的不同对细胞分别计数）的检测结果。请回答下列问题：
（1）乙动物肠上皮细胞的细胞周期时长为24 h,M期时长为1.9 h。若要在显微镜下观察细胞有丝分裂过程中染色体形态的变化，选用（填“甲”或“乙”）动物肠上皮细胞更合适。原因是。
（2）乙图中a峰和b峰之间的细胞正处于（填“G1”、“S”、“G2”、“M”）期。由图乙可推测抗癌药物抑制癌细胞增殖的机理可能是抑制了过程。
（3）细胞癌变的根本原因是。
（4）若用含放射性同位素的胸苷（DNA复制的原料之一）短期培养甲动物肠上皮细胞后，处于S期的细胞都会被标记。洗脱含放射性同位素的胸苷，换用无放射性的新鲜培养液培养，定期检测。预计最快约h后会检测到被标记的M期细胞。
（5）若向甲动物肠上皮细胞培养液中加入过量胸苷，处于S期的细胞立刻被抑制，而处于其他时期的细胞不受影响。预计加入过量胸苷约h后，细胞都将停留在S期。发布：2025/1/15 8:0:2组卷：18引用：1难度：0.6 -
3．细胞周期同步化是指利用一定方法使细胞群体处于同一细胞周期同一阶段的过程。如图是动物细胞周期同步化的方法之一，G1、S、G2、M期依次分别为10h、7h、3.5h、1.5h。使用DNA合成抑制剂选择性阻断S期，去除抑制剂后S期可继续进行，从而实现细胞周期同步化。下列叙述错误的是（ ）
发布：2024/12/31 0:0:1组卷：11引用：3难度：0.7
