径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到棉花细胞内，获得了转基因耐盐棉花新品种。图1是获取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图3是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图，请分析回答问题：
（1）将含有径柳匙叶草不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据TaNHX2基因的特定核苷酸序列从中提取图1的片段，此法为从 从基因文库中获取从基因文库中获取获取目的基因。
（2）不能在径柳匙叶草根尖分生区细胞中获得TaNHX2基因的mRNA，其原因是 Na+/K+逆向转运蛋白位于液泡膜上，径柳匙叶草根尖分生区细胞中TaNHX2基因不能表达Na+/K+逆向转运蛋白位于液泡膜上，径柳匙叶草根尖分生区细胞中TaNHX2基因不能表达。
（3）若用BamHⅠ切割图1所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用 Sau3AⅠSau3AⅠ切割图3所示质粒，以便构建基因表达载体，该方案的缺陷是 出现目的基因和质粒的自我环化、目的基因在质粒上的连接方向不确定出现目的基因和质粒的自我环化、目的基因在质粒上的连接方向不确定。故切割图1所示DNA片段的最佳方案是选用 EcoRⅠ和BamHⅠEcoRⅠ和BamHⅠ酶。
（4）用上述最佳方案构建基因表达载体，所得重组质粒 不一定能不一定能（选填“能”“不能”或“不一定能”）被BamHⅠ切割。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】从基因文库中获取；Na+/K+逆向转运蛋白位于液泡膜上，径柳匙叶草根尖分生区细胞中TaNHX2基因不能表达；Sau3AⅠ；出现目的基因和质粒的自我环化、目的基因在质粒上的连接方向不确定；EcoRⅠ和BamHⅠ；不一定能
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：19引用：1难度：0.7
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1．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
2．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：4引用：3难度：0.7
