2022年8月，九价HPV疫苗的使用人群扩展到9〜45岁适龄女性。研究发现，人类99.7%的宫颈癌是由人乳头瘤病毒（HPV）持续感染引起的。科研人员将HPV病毒表面L1衣壳蛋白基因构建重组质粒，导入大肠杆菌制备HPV疫苗，过程如图所示。请回答下列问题：
（1）构建重组质粒之前，可利用PCR技术扩增L1基因，此时需要在反应体系中添加的有机物质是 Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）、模板DNA、四种脱氧核苷酸和引物，其中引物的作用是 引物与单链的相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行伸延引物与单链的相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行伸延。若在PCR扩增仪中加入的L1基因有50个，经过30次循环后 共消耗引物的数量为 50×231-10050×231-100个。
（2）构建重组质粒时应选择的限制酶为 EcoRⅠ、XbaⅠEcoRⅠ、XbaⅠ，同时用Ca2+处理大肠杆菌使其处于 感受态感受态。重组质粒导入大肠杆菌后，可用添加 四环素四环素的培养基筛选，对长出的单菌落提取质粒进一步鉴定是否含有L1基因。
（3）有人认为，与传统的减毒或灭活疫苗相比，重组疫苗安全性更高，试从疫苗的结构角度推测其这一观点的合理性：传统疫苗灭活或减毒不彻底可能会导致接种者患病，重组疫苗不具有病毒结构，无侵染能力，但有抗原特性，可刺激机体产生抗体和记忆细胞传统疫苗灭活或减毒不彻底可能会导致接种者患病，重组疫苗不具有病毒结构，无侵染能力，但有抗原特性，可刺激机体产生抗体和记忆细胞。
【答案】Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）；引物与单链的相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行伸延；50×231-100；EcoRⅠ、XbaⅠ；感受态；四环素；传统疫苗灭活或减毒不彻底可能会导致接种者患病，重组疫苗不具有病毒结构，无侵染能力，但有抗原特性，可刺激机体产生抗体和记忆细胞
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：7引用：1难度：0.6
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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