接种疫苗是控制新冠肺炎的重要措施之一，新冠病毒疫苗有多种，我国科学家团队研发的腺病毒载体重组新冠病毒疫苗（重组疫苗）是一种基因工程疫苗。如图是构建含新冠病毒S蛋白（抗原）基因的重组腺病毒表达载体的过程，箭头表示NcoⅠ，SphⅠ，NheⅠ，BamHⅠ的酶切位点（四种酶的识别序列详见下表）。回答下列问题：
| 识别序列和切割位点限制酶 | NcoⅠ | SphⅠ | NheⅠ | BamHⅠ |
| C↓CATGG | CCATG↓C | G↓GATCC | G↓CTAGC |
cDNA
cDNA
，再经PCR技术获取大量S蛋白基因，PCR技术扩增S蛋白基因依据的原理是 DNA的半保留复制
DNA的半保留复制
。（2）根据图表可知，构建重组质粒时，需要选择的限制酶是
NcoⅠ和NheⅠ
NcoⅠ和NheⅠ
。将重组质粒导入受体细胞后，需要用 抗原-抗体杂交
抗原-抗体杂交
技术检测S蛋白是否成功合成。合成的S蛋白多次注射到实验鼠体内后，在实验鼠的脾脏中分离出浆细胞，利用 动物细胞融合、动物细胞培养
动物细胞融合、动物细胞培养
（答出两种）技术，至少经过 2
2
次筛选，就能得到 既能无限增殖，又能分泌专一抗体
既能无限增殖，又能分泌专一抗体
的杂交瘤细胞，该细胞经体外培养后就能得到大量的单克隆抗体，用于治疗新冠肺炎。（3）腺病毒是DNA病毒，对人体危害较小，利用腺病毒制备的重组腺病毒疫苗只需注射一针即可完成接种。数周后接种者体内仍然能检测到重组腺病毒DNA．请由此推测只需注射一针即可起到免疫保护作用的原因是
重组腺病毒DNA在人体细胞中持续表达抗原，反复刺激机体免疫系统
重组腺病毒DNA在人体细胞中持续表达抗原，反复刺激机体免疫系统
。【答案】cDNA；DNA的半保留复制；NcoⅠ和NheⅠ；抗原-抗体杂交；动物细胞融合、动物细胞培养；2；既能无限增殖，又能分泌专一抗体；重组腺病毒DNA在人体细胞中持续表达抗原，反复刺激机体免疫系统
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：12引用：3难度：0.5
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1．CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如图流程进行了实验。下列叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：7引用：3难度：0.6 -
2．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题：
（1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是，过程②选用的骨髓瘤细胞（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行和，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是（答出一点）。
（3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是。图2方框内需要经过次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是。发布：2024/12/31 1:30:1组卷：21引用：4难度：0.5 -
3．使用高效的细胞毒素药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。这限制了它在临床上的应用。抗体一药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/31 3:30:1组卷：18引用：2难度：0.7
