2019年底，新冠肺炎在我国大面积流行。病原体为一种新型RNA冠状病毒，即2019-nCoV。科研人员以病毒表面S蛋白作为主要的病毒抗原，拟利用基因工程研制新冠病毒重组蛋白疫苗用于接种预防。图1表示病毒S蛋白的基因，图2表示取自真菌细胞的质粒PcMV及其上部分限制酶切位点，图3表示疫苗制作的简要操作流程。
（1）图3中步骤①所需要的酶和原料是 逆转录酶和四种脱氧核苷酸逆转录酶和四种脱氧核苷酸。步骤②需要的酶是限制酶和 DNA连接酶DNA连接酶。
（2）图1中不能选择EcoRI和AccI两种限制酶切割S蛋白基因，原因是 这两种酶在S蛋白基因上有切割位点会破坏S蛋白基因的完整性这两种酶在S蛋白基因上有切割位点会破坏S蛋白基因的完整性。现在科研人员已经可以根据需要在目的基因两端添加需要的限制酶切割位点序列，但是一般不在目的基因的两端添加同一种酶切位点，原因是 防止目的基因（S蛋白基因）自身连接或反向连接在质粒上防止目的基因（S蛋白基因）自身连接或反向连接在质粒上。若选择两种酶且位点序列添加在S蛋白基因的左右两端（考虑转录的方向）应分别选择 ApaⅠ和SolⅠApaⅠ和SolⅠ。
（3）PcMV质粒上氨苄青霉素抗性基因的作用是 筛选和检测表达载体是否导入受体细胞筛选和检测表达载体是否导入受体细胞。
（4）将表达载体导入动物细胞中进行培养的原因是 PcMV质粒取自真菌，属真核细胞，导入动物细胞中易于基因的表达PcMV质粒取自真菌，属真核细胞，导入动物细胞中易于基因的表达。为了检验表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用S蛋白与新冠病毒肺炎康复患者血清进行 抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交实验，进行检测。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】逆转录酶和四种脱氧核苷酸；DNA连接酶；这两种酶在S蛋白基因上有切割位点会破坏S蛋白基因的完整性；防止目的基因（S蛋白基因）自身连接或反向连接在质粒上；ApaⅠ和SolⅠ；筛选和检测表达载体是否导入受体细胞；PcMV质粒取自真菌，属真核细胞，导入动物细胞中易于基因的表达；抗原-抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：22引用：2难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
