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纤维素酶是继淀粉酶和蛋白酶之后的全球第三大工业用酶制剂,被广泛地应用于生物能源、食品,造纸。纺织洗涤,医药、动物饲料以及农业废弃物处理等领域。
(1)某校园兴趣小组设计了A,B两种培养基(成分见表),试图从土壤中筛选出产纤维素酶的微生物。培养基A从物理状态看属于
固体
固体
培养基,目的是
从土壤中筛选出纤维素分解菌
从土壤中筛选出纤维素分解菌
。培养基B
不能
不能
 (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是
培养基B以淀粉为主要碳源,纤维素分解菌和其它微生物都能生长繁殖,不能用于分离和鉴别纤维素分解菌
培养基B以淀粉为主要碳源,纤维素分解菌和其它微生物都能生长繁殖,不能用于分离和鉴别纤维素分解菌

成分种类 酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 CR溶液 琼脂
培养基A + + + + - + +
培养基B + + + - + + +
注:“+”表示有,“-”表示无,CR为刚果红。
(2)用选择培养基选育高产纤维素酶菌株时,应选择培养基中
透明圈直径
透明圈直径
与菌落直径比值大的菌落。
(3)为纯化纤维素酶,科研人员进行如图操作:

透析处理的目的是
除去小分子杂质
除去小分子杂质
。粗提物中包含纤维素酶及其他杂蛋白。请写出一种纯化得到纤维素酶的方法及其纯化原理:
凝胶色谱法,原理:根据蛋白质相对分子质量的不同,将纤维素酶与杂蛋白分离(或电泳法,原理:蛋白质之间由于电荷、分子大小的差异产生不同的电泳速度,将纤维素酶与杂蛋白分离)
凝胶色谱法,原理:根据蛋白质相对分子质量的不同,将纤维素酶与杂蛋白分离(或电泳法,原理:蛋白质之间由于电荷、分子大小的差异产生不同的电泳速度,将纤维素酶与杂蛋白分离)

(4)经培养和筛选,兴趣小组分离纯化得到纤维素酶A和纤维素酶B。为比较两类纤维素酶的活性大小,请简要写出实验思路:
取三支试管分别加入等量的缓冲液,向三支试管中分别加入等量的蒸馏水、纤维素酶A、纤维素酶B,然后再向三支试管中分别加入等量的纤维素溶液,一段时间后,再向三支试管中分别加入等量的斐林试剂,水浴加热观察三支试管颜色变化。试管中生成的砖红色沉淀越多,说明纤维素水解生成的还原糖越多,纤维素酶的活性越高
取三支试管分别加入等量的缓冲液,向三支试管中分别加入等量的蒸馏水、纤维素酶A、纤维素酶B,然后再向三支试管中分别加入等量的纤维素溶液,一段时间后,再向三支试管中分别加入等量的斐林试剂,水浴加热观察三支试管颜色变化。试管中生成的砖红色沉淀越多,说明纤维素水解生成的还原糖越多,纤维素酶的活性越高
(提供缓冲液、纤维素酶A液、纤维素酶B液、斐林试剂等)。

【答案】固体;从土壤中筛选出纤维素分解菌;不能;培养基B以淀粉为主要碳源,纤维素分解菌和其它微生物都能生长繁殖,不能用于分离和鉴别纤维素分解菌;透明圈直径;除去小分子杂质;凝胶色谱法,原理:根据蛋白质相对分子质量的不同,将纤维素酶与杂蛋白分离(或电泳法,原理:蛋白质之间由于电荷、分子大小的差异产生不同的电泳速度,将纤维素酶与杂蛋白分离);取三支试管分别加入等量的缓冲液,向三支试管中分别加入等量的蒸馏水、纤维素酶A、纤维素酶B,然后再向三支试管中分别加入等量的纤维素溶液,一段时间后,再向三支试管中分别加入等量的斐林试剂,水浴加热观察三支试管颜色变化。试管中生成的砖红色沉淀越多,说明纤维素水解生成的还原糖越多,纤维素酶的活性越高
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:3引用:1难度:0.7
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    。在选择培养时,能够“浓缩”所需自生固氮菌的原因是
     

    发布:2024/10/27 17:0:2组卷:16引用:1难度:0.7
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