如图表示某种绿色荧光蛋白基因表达载体的构建过程，绿色荧光蛋白基因有720个碱基对（bp），质粒有5369个碱基对（bp）。请据图回答问题：
（1）质粒中“氨苄青霉素抗性基因”的作用是 便于筛选目的基因是否导入受体细胞便于筛选目的基因是否导入受体细胞。研究发现复制原点处的A和T特别多，有利于DNA复制时 解旋解旋过程的发生。
（2）限制酶 BamHⅠ的识别序列和切割位点是 G↓GATCC，该酶切形成的黏性末端是 —CTAG—CTAG。过程③所需的工具酶是 DNA连接酶DNA连接酶。
（3）已知图中质粒经 BamHⅠ、HindⅢ双酶切后进行电泳，出现了一条长度为5300bp的DNA条带，则重组质粒的长度为 6020bp6020bp的DNA片段条带。
（4）过程①用两种限制酶切割质粒，与单一酶切相比，其优势有 可以避免目的基因自身环化；可使目的基因定向插入到运载体中可以避免目的基因自身环化；可使目的基因定向插入到运载体中。过程②通过 PCR技术实现，进行 PCR时，需要在两种引物的 5'5'端分别添加 BamHⅠ和 HindⅢ的识别序列。
（5）将重组质粒导入大肠杆菌前，要用 CaCl2处理大肠杆菌，其目的是 使大肠杆菌处于感受态（或处于容易吸收DNA的状态）使大肠杆菌处于感受态（或处于容易吸收DNA的状态）；进行筛选时，大肠杆菌培养基中除需要加入水、无机盐、C源、N源、琼脂等物质外，还要分别添加 四环素、氨苄青霉素四环素、氨苄青霉素。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】便于筛选目的基因是否导入受体细胞；解旋；—CTAG；DNA连接酶；6020bp；可以避免目的基因自身环化；可使目的基因定向插入到运载体中；5'；使大肠杆菌处于感受态（或处于容易吸收DNA的状态）；四环素、氨苄青霉素
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：18引用：1难度：0.6
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
