马铃薯是我国重要的粮食作物之一，致病疫霉导致的晚疫病及干旱、高低温和盐胁迫等是导致其减产的重要原因。研究人员为探究StNPR4和StproNPR4基因在马铃薯应对生物胁迫和非生物胁迫中的功能进行了相关实验，基因表达载体构建示意图如图。
回答下列问题：
（1）用SacⅡ等限制酶切割含目的基因的DNA片段，与经相同酶切割后的pENTR-L16质粒用 DNA连接DNA连接酶连接，构建重组pENTR-L16。
（2）经 SacII和Kpn1SacII和Kpn1酶将含目的基因的片段切出并连接到载体pOREO4上构建重组pOREO4。
（3）经 农杆菌转化农杆菌转化法将重组pOREO4导入马铃薯细胞，得到5个转化品系，命名为1、2、3、4和5。
A.马铃薯基因相对表达量分析；B.马铃薯接种致病疫霉后病原菌相对生物量分析；C.150mmol•L-1的NaCl处理对马铃薯快繁生根率的影响；**表示组别间差异达到极显著水平
（4）①通过 分子杂交技术（PCR技术）分子杂交技术（PCR技术）等技术，检测 转基因不同品系转基因不同品系的目的基因转录水平。据图A分析，只有转基因品系 55的表达量显著低于野生型（WT）和其余4个转化品系，因此后续试验不再检测此品系。②据图B和图C分析：这样的转基因马铃薯的表达策略优势是 具有抗病性，致病疫霉相对生物量低；生根率高，存活能力强具有抗病性，致病疫霉相对生物量低；生根率高，存活能力强。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】DNA连接；SacII和Kpn1；农杆菌转化；分子杂交技术（PCR技术）；转基因不同品系；5；具有抗病性，致病疫霉相对生物量低；生根率高，存活能力强
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：14引用：3难度：0.5
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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