草甘膦是农业生产中使用的除草剂，从某种细菌中提取草甘膦抗性基因转入棉花植株，获得抗草甘膦的转基因棉花。回答下列问题。
（1）从细菌DNA中提取草甘膦抗性基因时，需要用特定的 限制酶（限制性内切核酸酶）限制酶（限制性内切核酸酶）处理细菌DNA。提取到的草甘膦抗性基因可通过 PCRPCR扩增。
（2）草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5′---ATGGCT………AGGAAC---3′
3′---TACCGA………TCCTTG---5′
根据上述序列，应选择 B、DB、D（填字母）作为引物进行草甘膦抗性基因的扩增。
A.引物：5′-TACCGA-3′
B.引物：5′-GTTCCT-3′
C.引物：5′-AUGGCU-3′
D.引物：5′-ATGGCT-3′
（3）要使草甘膦抗性基因能在受体细胞中正常表达，需要利用质粒构建成 基因表达载体基因表达载体，不能直接将草甘膦抗性基因导入受体细胞，原因是 需要把目的基因片段插入表达载体的启动子、终止子之间需要把目的基因片段插入表达载体的启动子、终止子之间。
（4）农杆菌转化法把草甘膦抗性基因导入棉花细胞，脱分化形成 愈伤组织愈伤组织后，草甘膦抗性基因没有表达，再分化发育成棉花植株后，草甘膦抗性基因正常表达，原因是 基因的选择性表达基因的选择性表达。
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】限制酶（限制性内切核酸酶）；PCR；B、D；基因表达载体；需要把目的基因片段插入表达载体的启动子、终止子之间；愈伤组织；基因的选择性表达
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：5引用：1难度：0.7
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
