近期,以武汉地区为中心爆发了新型冠状病毒(2019-nCoV)病例,该病毒是具外套膜的正链单股RNA病毒。目前,对于该病毒的检测手段主要为利用荧光PCR试剂盒对其核酸进行检 测。其原理是,通过提取病人样本中的RNA,进行反转录•聚合酶链式反应(RT-PCR,即先通 过逆转录获得cDNA,然后以其为模板进行 PCR),通过扩增反应将样本中微量的病毒信息加以放大,最后以荧光的方式读取信号。如果PCR之后信号为阳性,那么就可说样本中存在着病毒(已经感染),反之则说明没有感染。

(1)PCR扩增时在加入一对引物的同时还需加入一个特异性的荧光探针,其两端分别标记一个报告基团和一个淬灭基团。如图所示,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭 基团吸收;Taq酶在催化子链延伸时,还具有外切酶活性,它可以沿着5’→3’5’→3’(填“5'→3'”或“3'→5'”)方向将探针酶切降解,使报告基团和淬灭基团分离。于是,随 着DNA扩增次数的增加,荧光的强度会逐渐增大增大(填“增大”或“减小”),从而 实现了荧光信号的变化与PCR产物的形成完全同步。
(2)目前2019-nCoV的全基因组序列测定已完成,这有利于我们在研发病毒核酸检测试剂 盒时根据其基因组序列来设计引物和(荧光)探针引物和(荧光)探针。
(3)此外,对新型冠状病毒感染的诊断还可以通过抗体检测,这需要利用动物细胞工程中的生产单克隆抗体生产单克隆抗体技术,其优点为特异性强、灵敏度高、可大量制备特异性强、灵敏度高、可大量制备。
(4)为了预防、控制该病的发生、流行,科学人员正在紧急研发相应的疫苗,其中利用灭活的病毒制备的疫苗称为灭活疫苗,这里的“灭活”是指利用物理或化学手段使病毒失 去感染能力感染能力,但是并不破坏病原体的抗原结构抗原结构。此外,还可以利用基因工程基因工程 技术来 表达抗原蛋白,以大规模生产疫苗。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】5’→3’;增大;引物和(荧光)探针;生产单克隆抗体;特异性强、灵敏度高、可大量制备;感染能力;抗原结构;基因工程
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:34引用:1难度:0.6
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