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近期,以武汉地区为中心爆发了新型冠状病毒(2019-nCoV)病例,该病毒是具外套膜的正链单股RNA病毒。目前,对于该病毒的检测手段主要为利用荧光PCR试剂盒对其核酸进行检 测。其原理是,通过提取病人样本中的RNA,进行反转录•聚合酶链式反应(RT-PCR,即先通 过逆转录获得cDNA,然后以其为模板进行 PCR),通过扩增反应将样本中微量的病毒信息加以放大,最后以荧光的方式读取信号。如果PCR之后信号为阳性,那么就可说样本中存在着病毒(已经感染),反之则说明没有感染。

(1)PCR扩增时在加入一对引物的同时还需加入一个特异性的荧光探针,其两端分别标记一个报告基团和一个淬灭基团。如图所示,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭 基团吸收;Taq酶在催化子链延伸时,还具有外切酶活性,它可以沿着
5’→3’
5’→3’
(填“5'→3'”或“3'→5'”)方向将探针酶切降解,使报告基团和淬灭基团分离。于是,随 着DNA扩增次数的增加,荧光的强度会逐渐
增大
增大
(填“增大”或“减小”),从而 实现了荧光信号的变化与PCR产物的形成完全同步。
(2)目前2019-nCoV的全基因组序列测定已完成,这有利于我们在研发病毒核酸检测试剂 盒时根据其基因组序列来设计
引物和(荧光)探针
引物和(荧光)探针

(3)此外,对新型冠状病毒感染的诊断还可以通过抗体检测,这需要利用动物细胞工程中的
生产单克隆抗体
生产单克隆抗体
技术,其优点为
特异性强、灵敏度高、可大量制备
特异性强、灵敏度高、可大量制备

(4)为了预防、控制该病的发生、流行,科学人员正在紧急研发相应的疫苗,其中利用灭活的病毒制备的疫苗称为灭活疫苗,这里的“灭活”是指利用物理或化学手段使病毒失 去
感染能力
感染能力
,但是并不破坏病原体的
抗原结构
抗原结构
。此外,还可以利用
基因工程
基因工程
 技术来 表达抗原蛋白,以大规模生产疫苗。

【答案】5’→3’;增大;引物和(荧光)探针;生产单克隆抗体;特异性强、灵敏度高、可大量制备;感染能力;抗原结构;基因工程
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:34引用:1难度:0.6
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    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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