亚麻酸（ALA）能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响。分析回答：
①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在39℃、5%CO₂的培养箱中培养22～24h。
②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表1。
③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。
④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44～48h后检查分裂情况，每隔48h更换一次培养液，第5～9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2。
表1亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响

ALA浓度/μmol•L-1	卵母细胞数	核成熟卵子数
0	229	137
10	201	133
50	227	166
100	215	137
200	215	135

表2亚麻酸对水牛早期胚胎发育的影响

ALA浓度/μmol•L-1	培养卵数	分裂数	囊胚数
0	309	171	75
10	325	182	82
50	292	185	97
100	310	188	84
200	231	145	68

（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO₂ 的作用是

维持培养液的pH

维持培养液的pH

。
（2）步骤②中，成熟卵母细胞才可以进行受精，此时其细胞内染色体的行为特征是

染色体的着丝点排列在赤道板上

染色体的着丝点排列在赤道板上

。步骤③中，判断是否受精的依据是

在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到两个极体

在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到两个极体

。
（3）步骤④中，具32个细胞的胚胎发育时期是

桑葚胚期

桑葚胚期

，培养过程定期更换培养液的目的是

清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害

清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害

。
（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol•L^-1 时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起

促进

促进

作用。
（5）本实验结果表明，

50

50

μmol•L^-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利，其判断依据是

核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高

核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高

。