近年来,科学家们陆续在动物、植物、真菌和细菌中发现了朊病毒。2019年1月,《自然--通讯》杂志发表了来自我国科学家许晓东等人的研究成果,他们对一种杆状病毒的晚期表达因子LEF-10蛋白进行了研究,确定其为由病毒编码的朊病毒,此项研究将朊病毒存在的范围拓展至病毒界。至此,“朊病毒广泛存在”终于得到了证实。
(1)对LEF-10蛋白进行分离、纯化和鉴定,需采用凝胶色谱法凝胶色谱法及电泳技术。前者是利用相对分子质量大小分离蛋白质,而电泳是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身大小和形状等分子本身大小和形状等(答两点)的不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而分离样品的过程。对已纯化的蛋白质进行鉴定时,通常采用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,根据如图3所示的电泳结果,某同学得出“该蛋白质分子具有两条链”的结论。你认为这种说法可靠吗?请说明理由:不可靠,该结果只能说明有两种相对分子质量不同的肽链,不知道有几条不可靠,该结果只能说明有两种相对分子质量不同的肽链,不知道有几条。
(2)利用某酵母菌株进行实验,以确定 LEF-10蛋白是否能表现出朊病毒特性。已知酵母细胞中的Sup35蛋白受到一定刺激后可能会发生空间结构改变,变成朊病毒,Sup35蛋白以及“朊病毒化”后的Sup35蛋白对酵母细胞代谢过程影响如图1,部分实验结果如图2。

现利用LEF-10蛋白基因替代Sup35蛋白基因的部分序列(即决定 Sup35 蛋白朊病毒化的DNA 片段),新表达出的蛋白具备Sup35控制代谢的功能以及LEF-10的特性,培养观察酵母菌落特征。对培养基和培养皿的灭菌方式分别为高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法和干热灭菌法干热灭菌法。灭菌后的培养基需冷却至5050℃左右时倒平板,原因是:温度过高不便于用手操作,温度过低培养基将发生凝固温度过高不便于用手操作,温度过低培养基将发生凝固。培养结果出现白色白色菌落即可作为LEF-10蛋白可以表现出朊病毒特性的证据。
【答案】凝胶色谱法;分子本身大小和形状等;不可靠,该结果只能说明有两种相对分子质量不同的肽链,不知道有几条;高压蒸汽灭菌法;干热灭菌法;50;温度过高不便于用手操作,温度过低培养基将发生凝固;白色
【解答】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:13引用:2难度:0.7