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近年来,科学家们陆续在动物、植物、真菌和细菌中发现了朊病毒。2019年1月,《自然--通讯》杂志发表了来自我国科学家许晓东等人的研究成果,他们对一种杆状病毒的晚期表达因子LEF-10蛋白进行了研究,确定其为由病毒编码的朊病毒,此项研究将朊病毒存在的范围拓展至病毒界。至此,“朊病毒广泛存在”终于得到了证实。
(1)对LEF-10蛋白进行分离、纯化和鉴定,需采用
凝胶色谱法
凝胶色谱法
及电泳技术。前者是利用相对分子质量大小分离蛋白质,而电泳是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及
分子本身大小和形状等
分子本身大小和形状等
(答两点)的不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而分离样品的过程。对已纯化的蛋白质进行鉴定时,通常采用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,根据如图3所示的电泳结果,某同学得出“该蛋白质分子具有两条链”的结论。你认为这种说法可靠吗?请说明理由:
不可靠,该结果只能说明有两种相对分子质量不同的肽链,不知道有几条
不可靠,该结果只能说明有两种相对分子质量不同的肽链,不知道有几条

(2)利用某酵母菌株进行实验,以确定 LEF-10蛋白是否能表现出朊病毒特性。已知酵母细胞中的Sup35蛋白受到一定刺激后可能会发生空间结构改变,变成朊病毒,Sup35蛋白以及“朊病毒化”后的Sup35蛋白对酵母细胞代谢过程影响如图1,部分实验结果如图2。

现利用LEF-10蛋白基因替代Sup35蛋白基因的部分序列(即决定 Sup35 蛋白朊病毒化的DNA 片段),新表达出的蛋白具备Sup35控制代谢的功能以及LEF-10的特性,培养观察酵母菌落特征。对培养基和培养皿的灭菌方式分别为
高压蒸汽灭菌法
高压蒸汽灭菌法
干热灭菌法
干热灭菌法
。灭菌后的培养基需冷却至
50
50
℃左右时倒平板,原因是:
温度过高不便于用手操作,温度过低培养基将发生凝固
温度过高不便于用手操作,温度过低培养基将发生凝固
。培养结果出现
白色
白色
菌落即可作为LEF-10蛋白可以表现出朊病毒特性的证据。

【答案】凝胶色谱法;分子本身大小和形状等;不可靠,该结果只能说明有两种相对分子质量不同的肽链,不知道有几条;高压蒸汽灭菌法;干热灭菌法;50;温度过高不便于用手操作,温度过低培养基将发生凝固;白色
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:13引用:2难度:0.7
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