M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：
（1）在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是 限制性核酸内切酶（限制酶）限制性核酸内切酶（限制酶），这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键磷酸二酯键断开。
（2）在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是 清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（3）与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是 动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为 细胞体积小，细胞核大，核仁明显细胞体积小，细胞核大，核仁明显（答出两点即可），功能上具有 发育的全能性发育的全能性。
（4）鉴定转基因动物：以免疫小鼠的 BB淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路 取动物A和克隆动物A的肝组织细胞，分别提取蛋白质进行抗原—抗体杂交取动物A和克隆动物A的肝组织细胞，分别提取蛋白质进行抗原—抗体杂交。
【答案】限制性核酸内切酶（限制酶）；磷酸二酯键；清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害；动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难；细胞体积小，细胞核大，核仁明显；发育的全能性；B；取动物A和克隆动物A的肝组织细胞，分别提取蛋白质进行抗原—抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：384引用：3难度：0.5
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