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金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR）扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如图，请回答下列问题。
（1）从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA，通过逆转录逆转录获得cDNAcDNA用于PCR扩增。
（2）设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物（引物1和引物2），为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶的切割位点。设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对碱基互补配对而造成引物自连。
（3）图中步骤1代表变性变性，步骤2代表复性，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环。
（4）PCR扩增时，复性温度的设定是成败的关键。复性温度过高会破坏引物与模板引物与模板的碱基配对。复性温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但G-CG-C的引物需要设定更高的复性温度。
（5）如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有②③②③（填序号）。
①升高复性温度
②降低复性温度
③重新设计引物
【考点】目的基因的筛选与获取；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】逆转录；cDNA；限制性核酸内切酶；碱基互补配对；变性；引物与模板；G-C；②③
【解答】
【点评】
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