科研人员获得了抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如图所示。
（1）在构建基因表达载体时，为防止酶切产物自身环化（反向连接）自身环化（反向连接），需用2种限制酶，选择的原则是：①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点（只有一个酶切位点）只有一个切割位点（只有一个酶切位点）；②酶切后，G基因形成的两个黏性末端（序列）不相同（序列）不相同。
（2）将G基因插入到Ti质粒的T-DNAT-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使G基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞的染色体的DNA染色体的DNA上，使G基因的遗传特性得以稳定维持和表达。除了图中所示方法，将目的基因导入植物细胞的方法还有基因枪法基因枪法和花粉管通道法花粉管通道法。
（3）由愈伤组织培育成A植株的过程运用的技术手段是植物组织培养植物组织培养，其依据的原理是植物细胞的全能性（细胞的全能性）植物细胞的全能性（细胞的全能性）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】自身环化（反向连接）；只有一个切割位点（只有一个酶切位点）；（序列）不相同；T-DNA；染色体的DNA；基因枪法；花粉管通道法；植物组织培养；植物细胞的全能性（细胞的全能性）
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：19引用：1难度：0.7
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
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