新型冠状病毒的检测方法很多,实时荧光RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)法是目前核酸检测的主要方法,操作流程:采集样本→提取RNA→逆转录成cDNA→PCR扩增→结果分析。如图是RT-PCR两步法的过程图,在PCR扩增时加入能与目的基因(新冠病毒的核壳蛋白N基因)结合的荧光探针。目的基因合成越多,荧光信号越强,回答下列问题。

(1)构建cDNA文库时,会利用 限制性核酸内切酶、DNA 连接限制性核酸内切酶、DNA 连接酶,将cDNA断开并与载体结合,然后把各个片段 转化转化到一个受体菌群中储存。cDNA文库构建的意义有 能从文库中筛选获取目的基因、物种的分子保存等能从文库中筛选获取目的基因、物种的分子保存等(回答1点)。
(2)在配置PCR扩增液时,加入的荧光探针序列:5′-TTGCT……AGATT-3′,如果模板中存在N基因序列,与探针结合的序列应该是5′-AATCT…AGCAAAATCT…AGCAA-3′。如果某人没有感染新冠病毒,则PCR时DNA实时荧光信号强度 不变不变(增强/减弱/不变)。
(3)我国前不久推出新冠病毒抗原检测的方法,相较核酸检测,方便简单,出结果较快,其原理是 抗原与抗体特异性结合抗原与抗体特异性结合,目前国家推广“抗原筛查,核酸诊断”的监测模式,如果取样中所含病原体数量较少时,核酸检测的优点是 如果取样中所含病原体数量较少时,抗原检测很难测出,而核酸检测有扩增环节,对病原体检测灵敏如果取样中所含病原体数量较少时,抗原检测很难测出,而核酸检测有扩增环节,对病原体检测灵敏。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定.
【答案】限制性核酸内切酶、DNA 连接;转化;能从文库中筛选获取目的基因、物种的分子保存等;AATCT…AGCAA;不变;抗原与抗体特异性结合;如果取样中所含病原体数量较少时,抗原检测很难测出,而核酸检测有扩增环节,对病原体检测灵敏
【解答】
【点评】
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