我国抗虫棉研究居国际领先水平，具体操作是将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如图所示。请回答下列问题：
（1）与棉花细胞核基因相比较，Bt蛋白基因在结构上不具有 编码区的内含子编码区的内含子序列。
（2）通常情况下，获得的目的基因需要进行扩增，最简便的方法是 PCRPCR技术，利用该技术扩增目的基因，其前提是要有 一段已知目的基因的核苷酸序列一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。
（3）为了使扩增的DNA片段更方便与Ti质粒连接，需在两条引物上设计并加入不同的限制性酶切位点，主要目的是 使DNA片段能定向插入棉花细胞的染色体中，减少自连和环化使DNA片段能定向插入棉花细胞的染色体中，减少自连和环化。
（4）过程②中，应优先选用棉花受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，选用这种叶片的理由是 叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞。
（5）蛋白质工程是二代基因工程，它的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→预测相应的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。
（6）卡拉霉素抗性基因的作用是 筛选含有目的基因的受体细胞筛选含有目的基因的受体细胞。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】编码区的内含子；PCR；一段已知目的基因的核苷酸序列；使DNA片段能定向插入棉花细胞的染色体中，减少自连和环化；叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞；推测应有的氨基酸序列；筛选含有目的基因的受体细胞
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：12引用：1难度：0.5
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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