图甲中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点，图乙为某种基因表达载体示意图（载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的）。利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素时，需用到图乙所示质粒以及图甲所示的有关酶。请回答下列问题：
（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有①②③④①②③④（多选题，填序号）。
①能自我复制 ②具有标记基因 ③能启动外源目的基因的转录和翻译 ④含有多个酶切位点
（2）可以从下列哪些人体细胞中获取生产人胰岛素的目的基因①②③①②③（多选题，填序号）。
①消化道黏膜上皮细胞 ②胰岛A细胞 ③胰岛B细胞 ④成熟红细胞
（3）经BamHⅠ酶切割得到的目的基因能能（填“能”或“不能”）与图乙所示质粒被Sau3AⅠ酶切后的产物连接，理由是Sau3AⅠ与BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同Sau3AⅠ与BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同。
（4）将人胰岛素基因与图乙所示质粒所拼接的重组质粒导入到大肠杆菌的常用方法是农杆菌转化法农杆菌转化法，检测目的基因是否导入成功，可用含有四环素四环素的培养基进行初步筛选。目的基因成功表达的标志是合成胰岛素合成胰岛素。
（5）已知图乙所示质粒经EcoRⅠ和Sau3AⅠ联合酶切后形成2.0kb和4.2kb（lkb=1000对碱基）两种DNA片段。若将0.8kb的单个基因插在质粒的Sau3AⅠ位点处，所形成的重组质粒用EcoRⅠ和Sau3AⅠ联合酶切后，能形成的DNA片段长度分别为4.2kb、0.8kb、2kb4.2kb、0.8kb、2kb。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】①②③④；①②③；能；Sau3AⅠ与BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同；农杆菌转化法；四环素；合成胰岛素；4.2kb、0.8kb、2kb
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：17引用：2难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
