新冠病毒已蔓延至全球，研制新冠疫苗，广泛接种疫苗可以快速建立免疫屏障。如图1是利用新冠病毒包膜表面的S蛋白制备疫苗的相关过程，质粒A上的m、n分别是启动子和终止子，SUC2是标记基因。如表1是5种限制酶及其识别序列，请回答问题：
（1）新冠病毒的基因是有遗传效应的 RNARNA片段，为了使目的基因正常复制并成功导入质粒，需要在PCR扩增之前设计两种引物分子，并在引物分子的 5′5′（填“5′”或“3′”）端添加合适的限制酶识别序列。引物的作用是 界定要扩增的目的基因；是逆转录酶、Taq酶的结合部位；是子链延伸的起点界定要扩增的目的基因；是逆转录酶、Taq酶的结合部位；是子链延伸的起点。
（2）图1中②过程所使用的两种限制酶是 NheⅠ、NcoⅠNheⅠ、NcoⅠ，图中目的基因表达的模板链是 上链上链（填“上链”或“下链”），理由是 结合质粒上限制酶酶切位点可知，目的基因的上链位于重组质粒的内侧，下链位于外侧，转录方向3′为m→n,且转录只能从模板链的3′端开始，因此上链是模板链结合质粒上限制酶酶切位点可知，目的基因的上链位于重组质粒的内侧，下链位于外侧，转录方向3′为m→n,且转录只能从模板链的3′端开始，因此上链是模板链。
（3）以RNA为模板，通过RT-PCR（反转录PCR）技术可获取大量目的基因。进行RT-PCR时，一般要加入4种脱氧核糖核苷三磷酸（dNTP）而不是脱氧核苷酸，原因是dNTP能为子链的延伸过程提供 能量和原料能量和原料，同时需加入的酶有 逆转录酶和Taq酶逆转录酶和Taq酶。
（4）PCR的产物一般通过电泳来鉴定，结果如图2所示。1号泳道为标准（Marker），2号泳道为阳性对照（提纯的S蛋白基因片段），3号泳道为实验组。标准（Marker）的实质为 不同已知长度的DNA片段混合物不同已知长度的DNA片段混合物，阴性的样本有时在3号泳道中也会出现假阳性的杂带，其原因一般有 实验的模板受到污染、引物的特异性不强、退火温度偏低等实验的模板受到污染、引物的特异性不强、退火温度偏低等（至少答出两点）。
（5）DNA和mRNA也能够成为疫苗。在两者中，mRNA疫苗mRNA疫苗的安全性更有优势，因为它可以被正常细胞降解，不会整合到人体细胞的基因组中造成难以预料的结果而备受人们青睐；另外，它的研发周期较短，对快速应对大规模爆发性传染疾病具有重要的意义。
【考点】免疫学的应用．
【答案】RNA；5′；界定要扩增的目的基因；是逆转录酶、Taq酶的结合部位；是子链延伸的起点；NheⅠ、NcoⅠ；上链；结合质粒上限制酶酶切位点可知，目的基因的上链位于重组质粒的内侧，下链位于外侧，转录方向3′为m→n，且转录只能从模板链的3′端开始，因此上链是模板链；能量和原料；逆转录酶和Taq酶；不同已知长度的DNA片段混合物；实验的模板受到污染、引物的特异性不强、退火温度偏低等；mRNA疫苗
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：20引用：1难度：0.5
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1．目前我国规定儿童在出生后24h内需接种第一针乙肝疫苗和卡介苗（免疫结核病），儿童在接种该疫苗后不会发生的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：5引用：3难度：0.7 -
2．新型冠状病毒在世界范围内传播已有一段时间，各国在防止病毒传播、扩散的同时，都在努力加快疫苗研发进度；到目前为止，已有部分疫苗进入临床使用阶段。如图是部分疫苗制备的流程，结合图回答有关问题。
（1）灭活疫苗方案具有技术方案简单、成熟度高、研发快速的优点，但作用效果低，即在体外培养新冠病毒，经过灭活减毒处理后注入人体刺激其产生。
（2）若制备腺病毒载体新冠病毒疫苗，首先需要在作用下，以新冠病毒的遗传物质RNA为模板经过逆转录获得DNA；此外，还需要酶参与，才能制备重组的腺病毒，该步骤在基因工程中被称为；
（3）核酸疫苗，也称基因疫苗，是指将含有编码的蛋白基因序列的质粒载体导入宿主体内，通过宿主细胞表达抗原蛋白，诱导宿主细胞产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗制备更加简易，更加安全，使用更加方便。下面是制作关于2019-nCoV的RNA疫苗的简化过程：扩增该病毒的某种基因→插入病毒复制子中→病毒自我复制并提取mRNA→混入载体（如脂质体）中。而DNA疫苗的制备方法为将2019-nCoV的基因插入基因表达载体，并提取质粒使用。在扩增该病毒的某种基因时，可用（请写完整中文名称）技术，扩增时的三个阶段分别变性，复性和；扩增时需加入引物，如扩增n次，则需要引物个；引物不宜过短的原因是。
（4）新冠疫苗制备后，经过一段时间后，可能会起不到良好的预防作用，原因是。发布：2024/12/31 5:0:5组卷：4引用：2难度：0.6 -
3．麻疹病毒减毒活疫苗的广泛接种，显著降低了麻疹的发病率。世界卫生组织已将麻疹列为优先消灭目标。下列相关叙述错误的是（ ）
发布：2024/12/31 5:30:3组卷：2引用：2难度：0.7
