科研人员为探究某药物抗肺癌的作用机理，进行了一系列动物细胞培养和该药物药理实验。回答下列问题：
（1）在动物细胞培养过程中，需要使用 胰蛋白胰蛋白酶。使用的目的是将组织分散成单个细胞；由于动物细胞培养具有 贴壁生长、接触抑制贴壁生长、接触抑制现象，因此也需要使用该酶处理，然后分瓶培养，该培养过程称为 传代传代培养。
（2）为防止肺癌细胞培养过程中发生污染，需要加入抗生素；同时还要提供适宜的温度、pH、O2 和CO2等环境条件。此外，每48h更换一次培养液，目的是 提供营养物质，清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害提供营养物质，清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（3）DNA拓扑异构酶Ⅱ（简称TopoⅡ）为真核生物所必需，在DNA复制、转录等方面发挥重要作用，TopoⅡ在肿瘤细胞中含量明显高于正常细胞。用该药物处理肺癌细胞48h后，采用逆转录一聚合酶链式反应技术检测TopoⅠ基因的表达情况，结果如下：
| 该药物浓度 | 0 | 0.10 | 0.20 | 0.40 |
| TopoⅡ基因表达量 | ++++++ | ++++ | ++ | + |
cDNA
cDNA
，再以其为模板进行PCR扩增。为完成PCR扩增需要添加 引物、热稳定DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸
引物、热稳定DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸
。②由此可知，该药物在分子水平上影响肺癌细胞的作用机理是
抑制TopoⅡ基因的转录，最终导致TopoⅡ含量降低，且药物浓度越高，抑制作用越强
抑制TopoⅡ基因的转录，最终导致TopoⅡ含量降低，且药物浓度越高，抑制作用越强
。【考点】动物细胞培养的条件与过程．
【答案】胰蛋白；贴壁生长、接触抑制；传代；提供营养物质，清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害；cDNA；引物、热稳定DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸；抑制TopoⅡ基因的转录，最终导致TopoⅡ含量降低，且药物浓度越高，抑制作用越强
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：21引用：2难度：0.6
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1．动物细胞培养和植物组织培养是细胞工程的基本技术，下列关于这两项技术的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：29引用：2难度：0.7 -
2．回答与基因工程、动物克隆和胚胎工程有关的问题：
（1）几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。在进行基因工程操作时，可以从植物体中提取几丁质酶的mRNA，以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是。若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。
（2）为了提高动物成纤维细胞克隆形成率，可以选择适宜的培养基、添加牛血清、以支持生长等措施。当第一个卡氏瓶中的细胞浓度不再增加时，若要细胞继续增殖，可采用的方法是。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO2浓度，CO2的作用是。
（3）下列关于胚胎工程的叙述，错误的是
A．在动物的饲料中添加一定量的促性腺激素促使超数排卵
B．若在囊胚期进行胚胎分割，内细胞团均等分割，滋养成则不必
C．可以从雌性动物体内卵泡处吸取卵泡液，取出卵母细胞进一步培养成熟
D．胚胎成纤维细胞可以用于胚胎干细胞的培养，因为其能分泌抑制细胞分化的物质。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：4引用：1难度：0.7 -
3．据国际糖尿病联盟最新数据，2021年全球约5.37亿成人患有糖尿病，670万成人因糖尿病或其并发症死亡。如图是研究人员提出的治疗方案，请回答下列问题：
（1）从患者体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为。一般来说，动物细胞培养需要的条件有（少答出两点）。
（2）利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是。目前临床用的胰岛素生效较慢，科学家将胰岛素β链的第28和29个氨基酸调换顺序，成功获得了速效胰岛素。生产速效胰岛素，需要对进行定向改造。
A.胰岛素
B.胰岛素mRNA
C.胰岛素基因
D.胰岛
（3）欲检测胰岛类似细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能，可设计如下实验：将等量的胰岛类似细胞与正常胰岛B细胞分别加入两组相等浓度的培养液中，适宜且相同条件下进行培养，一段时间后分别检测两组培养液中。
（4）该治疗糖尿病的方法与异体移植相比，突出的优点是。发布：2024/12/31 2:30:2组卷：35引用：2难度：0.6
