基因工程的相关技术可用于病毒检测,也可用于制备疫苗。利用荧光PCR技术检测是否感染某种RNA病毒时,基本操作流程为:提取病毒的RNA→荧光PCR扩增反转录DNA→荧光检测。请回答下列问题:
(1)分离病毒的RNA通常在冰浴条件下进行,目的是抑制RNA酶RNA酶的活性,防止病毒的RNA降解。荧光PCR反应体系中需要加入的酶和原料是反转录酶、Taq酶和4种脱氧核苷酸反转录酶、Taq酶和4种脱氧核苷酸。为保证反应体系只扩增病毒特异性核酸序列,应先根据病毒的特异性核酸序列设计2种引物2种引物。
(2)荧光染料能掺入DNA双链中发出荧光,在游离状态下不发出荧光。若检测到荧光量达到某个临界值,则代表阳性,说明样本中含有病毒的RNA样本中含有病毒的RNA。若检测出现“假阴性”现象,原因可能是病毒的RNA在提取过程中发生降解病毒的RNA在提取过程中发生降解。
(3)某病毒的E蛋白和P蛋白会引起机体产生特异性免疫反应。构建重组活病毒载体疫苗时,获取某病毒的E基因和P基因E基因和P基因插入腺病毒的基因组中。通过重组腺病毒感染动物可使其获得免疫力,原因是重组腺病毒在动物体内表达E蛋白和P蛋白,刺激动物产生特异性抗体和记忆细胞重组腺病毒在动物体内表达E蛋白和P蛋白,刺激动物产生特异性抗体和记忆细胞。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定.
【答案】RNA酶;反转录酶、Taq酶和4种脱氧核苷酸;2种引物;样本中含有病毒的RNA;病毒的RNA在提取过程中发生降解;E基因和P基因;重组腺病毒在动物体内表达E蛋白和P蛋白,刺激动物产生特异性抗体和记忆细胞
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:22引用:2难度:0.7
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