有研究表明CDKN2B基因与小鼠的寿命有关，科学家将该基因导入小鼠体内，统计其寿命是否高于正常小鼠。图1表示CDKN2B基因与相关限制酶酶切位点，该基因转录出的mRNA碱基序列与A链的碱基序列相同（T、U视为相同的碱基），图2为质粒简图，请回答下列有关问题：
（1）科学家首先采用PCR技术对目的基因进行扩增。PCR-过程中有两次升温一次降温，其中降温的目的是让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
（2）科学家在构建基因表达载体过程时，目的基因应插在启动子启动子和终止子终止子之间才能正常表达。单独使用限制酶HindⅢ分别切割目的基因和载体后产生黏性末端。携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，发现约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白，原因是部分基因反向连接部分基因反向连接。为了避免这种现象的发生，应对以上方法进行改进，改进措施为同时用PstⅠ，EcoRI分别对目的基因和载体进行酶切同时用PstⅠ，EcoRI分别对目的基因和载体进行酶切。
（3）若想让一个转入了自的基因的受精卵发育成多个个体，可以采用胚胎分割胚胎分割技术，操作时应注意做到将囊胚的内细胞团均等分割将囊胚的内细胞团均等分割。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；启动子；终止子；部分基因反向连接；同时用PstⅠ，EcoRI分别对目的基因和载体进行酶切；胚胎分割；将囊胚的内细胞团均等分割
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：8引用：1难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
