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牛的雄性胚胎中存在特异性的H-Y抗原,可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体,筛选胚胎进行移植,以利用乳腺生物反应器进行生物制药。为研制H-Y单克隆抗体,某同学以小鼠甲为实验材料设计了如图实验流程。请回答有关问题:

(1)转基因动物通过分泌的乳汁来生产所需要的药品,称为乳腺生物反应器。将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的
启动子
启动子
等调控组件重组在一起,通过
显微注射
显微注射
的方法,导入哺乳动物的
受精卵
受精卵
中,然后使其生长发育成转基因动物。
(2)上述实验前必须给小鼠甲注射H-Y抗原,该处理的目的是
诱导小鼠甲产生能够分泌H-Y抗体的B淋巴细胞
诱导小鼠甲产生能够分泌H-Y抗体的B淋巴细胞

(3)实践中常用
聚乙二醇
聚乙二醇
作为促融剂,以提高细胞融合的成功率。
(4)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤:
取小鼠甲脾脏剪碎,用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞,加入培养液制成单细胞悬液
取小鼠甲脾脏剪碎,用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞,加入培养液制成单细胞悬液

(5)研究发现,在小鼠细胞内DNA的合成有两条途径,主要途径(简称D途径)是在细胞内由氨基酸和其他小分子化合物合成核苷酸,进而合成DNA的过程,该过程中叶酸必不可少,氨基蝶呤是叶酸的拮抗剂,可以阻断此途径;另一辅助途径(简称S途径)是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶的催化作用合成DNA,骨髓瘤细胞缺乏催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成的酶。
①图中筛选1利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的
氨基蝶呤
氨基蝶呤
具有筛选杂交瘤细胞的作用。骨髓瘤细胞及其互相融合细胞不能在HAT培养基上增殖,其原因是
缺乏催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核苷酸的酶
缺乏催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核苷酸的酶

②图中筛选2含多次筛选,筛选所依据的基本原理是
抗体与抗原特异性结合
抗体与抗原特异性结合
,筛选的目的是
获得能产生专一抗体的杂交瘤细
获得能产生专一抗体的杂交瘤细

(6)通常选用囊胚期的早期胚胎做雌雄鉴别,鉴别后的
雌性
雌性
胚胎符合要求,可做胚胎移植。

【答案】启动子;显微注射;受精卵;诱导小鼠甲产生能够分泌H-Y抗体的B淋巴细胞;聚乙二醇;取小鼠甲脾脏剪碎,用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞,加入培养液制成单细胞悬液;氨基蝶呤;缺乏催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核苷酸的酶;抗体与抗原特异性结合;获得能产生专一抗体的杂交瘤细;雌性
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:13引用:2难度:0.6
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    发布:2024/12/31 1:30:1组卷:7引用:3难度:0.6
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    (1)与植物体细胞杂交相比,图2中过程②特有的诱导融合的方法是 
     
    ,过程②选用的骨髓瘤细胞 
     
    (选填“能”或“不能”)在HAT培养基上生长。
    (2)对③筛选出的杂交瘤细胞,还需进行
     
     
    ,才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比,单克隆抗体最主要的优点是
     
    (答出一点)。
    (3)图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是
     
    。图2方框内需要经过
     
    次筛选,才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为
     
    、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻,需进行传代培养。
    (4)与直接使用长春碱相比,将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药,对人体的副作用更小,原因是
     

    发布:2024/12/31 1:30:1组卷:21引用:4难度:0.5
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    发布:2024/12/31 3:30:1组卷:18引用:2难度:0.7
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