氢能是潜力巨大的可再生清洁能源。利用产气肠杆菌制氢具有条件温和、环保等优点。E.as菌是产氢率较高的菌种，为进一步提高其产氢率，科研人员开展了相关研究。回答下列问题。
（1）为获得 E.as菌纯培养物，可采用 平板划线（或稀释涂布平板）平板划线（或稀释涂布平板）法进行纯培养。在培养过程中，设置未接种的平板作为对照，这样做的目的是 检测培养过程中是否被杂菌污染检测培养过程中是否被杂菌污染。
（2）为确定 E.as菌产氢率的最适温度，某同学进行了相关实验，请简要写出实验思路。 在一定温度范围内设置一系列温度梯度，其他条件相同且适宜的条件下，分别培养等量的E.as菌，一段时间后分别测定各组E.as菌的产氢率。若测得的数据出现峰值，则峰值所对应的温度即为该菌的最适产氢温度。否则，扩大温度范围，继续实验，直到出现峰值。（或：产氢率最高时所对应的温度为该菌的最适产氢温度。）在一定温度范围内设置一系列温度梯度，其他条件相同且适宜的条件下，分别培养等量的E.as菌，一段时间后分别测定各组E.as菌的产氢率。若测得的数据出现峰值，则峰值所对应的温度即为该菌的最适产氢温度。否则，扩大温度范围，继续实验，直到出现峰值。（或：产氢率最高时所对应的温度为该菌的最适产氢温度。）
（3）E.as菌细胞中hycA基因表达会抑制产氢代谢，科研人员通过同源重组方式使hycA蛋白失活，获得了产氢率更高的工程菌E.as⁃A，其技术流程如图所示。
①过程Ⅰ中可采用 Ca2+处理Ca2+处理法处理E.as菌，以促进DNA片段P的导入。
②过程Ⅱ中，同源重组导致hycA蛋白失活，其机制是 DNA片段P与hycA基因发生同源重组，使hycA基因发生突变，导致该基因不能表达或表达的蛋白质发生改变，使其不能发挥作用DNA片段P与hycA基因发生同源重组，使hycA基因发生突变，导致该基因不能表达或表达的蛋白质发生改变，使其不能发挥作用。依据基因工程原理，采取其他手段也可达到同样的失活效果，可采用的其他手段有 基因敲除（或转反义基因，或RNA干扰）基因敲除（或转反义基因，或RNA干扰）（写出一项即可）。
③过程Ⅲ应将菌种接种到含有 卡那霉素（和氯霉素）卡那霉素（和氯霉素）的培养基上进行筛选，最终获得E.as-A工程菌。
【答案】平板划线（或稀释涂布平板）；检测培养过程中是否被杂菌污染；在一定温度范围内设置一系列温度梯度，其他条件相同且适宜的条件下，分别培养等量的E.as菌，一段时间后分别测定各组E.as菌的产氢率。若测得的数据出现峰值，则峰值所对应的温度即为该菌的最适产氢温度。否则，扩大温度范围，继续实验，直到出现峰值。（或：产氢率最高时所对应的温度为该菌的最适产氢温度。）；Ca2+处理；DNA片段P与hycA基因发生同源重组，使hycA基因发生突变，导致该基因不能表达或表达的蛋白质发生改变，使其不能发挥作用；基因敲除（或转反义基因，或RNA干扰）；卡那霉素（和氯霉素）
【解答】
【点评】
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